新生鼠T细胞胸腺内外凋亡动态分析

发布时间：2017-04-29 01:13

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【摘要】：目的探究小鼠出生后胸腺细胞的动态发育及胸腺细胞胸腺内外凋亡的状况,为进一步阐明胸腺细胞胸腺内外凋亡的真实状况提供新的证据。方法以刚出生后1天、3天、7天、14天和28天的C57BL/6小鼠为细胞凋亡检测对象:分别取胸腺、脾脏及血液制备细胞悬液;取出生后7、14天的C57BL/6小鼠的胸腺及脾脏器官,制备冰冻切片。悬浮细胞进行以下处理:(1)胸腺细胞紫外照射及地塞米松诱导为阳性对照组;(2)CD3抗体及Annexin V/7-AAD联合染色;(3)F4/80抗体染色;(4)Annexin V-Alexa Fluor488/PI双染;(5)提取细胞DNA。分别利用流式细胞术、荧光显微镜及琼脂糖凝胶电泳技术进行细胞凋亡相关检测;胸腺及脾脏冰冻切片进行TUNEL染色,利用荧光显微镜对凋亡细胞进行原位观察。结果在自然状态下,小鼠胸腺细胞中CD3+T细胞百分率随日龄增长变化幅度不大,而外周免疫器官(脾脏)中CD3+T细胞含量显著增加;小鼠胸腺细胞平均凋亡率约为1.6%,不同日龄间未见明显差异;各时间点脾脏、血液中CD3+T细胞凋亡率及巨噬细胞比率均显著高于胸腺。结论在自然状态下幼龄小鼠胸腺功能已接近成熟稳定,而外周免疫器官(脾脏)随小鼠的年龄不断发育变化;小鼠脾脏、血液中CD3+T细胞凋亡率显著高于胸腺,提示除胸腺外,脾脏及血液可能为T细胞完全成熟前的凋亡部位。
【关键词】：胸腺细胞 凋亡 流式细胞术
【学位授予单位】：辽宁医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R392.12
【目录】：

• 中文论著摘要4-5
• 英文论著摘要5-7
• 英文缩略语表7-9
• 前言9-11
• 实验材料与方法11-16
• 实验结果16-25
• 讨论25-28
• 结论28-29
• 本研究创新性的自我评价29-30
• 参考文献30-32
• 附录32-41
• 综述32-38
• 参考文献35-38
• 在学期间科研成绩38-39
• 致谢39-40
• 个人简介40-41

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本文编号：333937