鹦鹉热衣原体MOMP、MIP重组核酸菌影疫苗的免疫保护作用

发布时间：2021-08-14 10:14

　　目的:构建鹦鹉热衣原体（Cps）MOMP和MIP蛋白的重组核酸菌影疫苗,分析其免疫活性及抗Cps感染作用,为Cps疫苗的研制提供实验依据。方法:构建p ET 30a-MOMP原核表达载体,诱导表达并纯化重组MOMP蛋白。构建pc DNA3.1（+）-MOMP和pc DNA3.1（+）-MIP真核重组质粒,氯化钙法分别将其装载入化学渗透压裂解法制备的E.coli JM109空菌影（BG）中,制备重组核酸菌影pc DNA3.1（+）-MOMP BG和pc DNA3.1（+）-MIP BG;并鉴定其在鼠源性巨噬细胞RAW 264.7中的表达。设立PBS和空BG对照组、pc DNA3.1（+）-MOMP、pc DNA3.1（+）-MIP、pc DNA3.1（+）-MOMP BG、pc DNA3.1（+）-MIP BG、pc DNA3.1（+）-MOMP/MIP BG联合免疫和pc DNA3.1（+）-MOMP/MIP BG联合免疫蛋白加免（Heterologous boost,He;即免疫3次后最后一次免疫用重组蛋白加免）实验组,以后腿肌注免疫途径免疫BALB/c鼠,共免疫四次。末次免疫1 w... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：97 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

MOMPPCR产物琼脂糖凝胶电泳结果分析

图 4.2 重组 pET 30a-MOMP 菌液 PCR 琼脂糖凝胶电泳结果分析arose gel electrophoresis analysis of recombinant pET 30a-MOMP PC1: DNA marker; 2～5: PCR products of recombinant MOMP图 4.3 pET 30a MOMP 重组质粒的双酶切鉴定

图 4.3 pET 30a MOMP 重组质粒的双酶切鉴定4.3 Double enzyme digestion of recombinant pET 30a-M; 2: recombinant pET 30a-MOMP; 3: recombinant pET 30aby BamH I and Xho I-MOMP 原核表达克隆载体的诱导表达m 振荡摇菌培养，0.2 mM IPTG 诱导表达，SDKDa 的预期分子量大小的目的蛋白（图 4.4）。

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]猪流产衣原体Pmp18N-rVCG疫苗的构建、小鼠免疫评价和机制研究[D]. 潘青.中国农业大学 2015

硕士论文
[1]IL-12、IL-18及OPN在HBV相关性肝脏疾病中的水平及其临床意义[D]. 金燕.延边大学 2014
[2]乙型肝炎肝硬化患者FoxP3 mRNA表达及血清IL-12、IL-18水平的变化[D]. 李娜.泸州医学院 2013
[3]应用抗菌肽—超高压制备肺炎克雷伯菌和副猪嗜血杆菌菌影方法的建立[D]. 胡本钢.吉林大学 2012



本文编号：3342280