家蝇CCTζ基因的cDNA克

发布时间：2021-08-18 00:16

　　目的:从家蝇的EST测序数据库中筛选获得家蝇的CCT（chaperonin containing t-complex polypeptide）基因MD-CCTζ,上传Gen Bank分析分子特性后,进行c DNA克隆、表达;探讨MD-CCTζ基因在家蝇不同组织和发育时期的时空表达模式;初步研究在不同病原微生物和热胁迫条件下家蝇3龄幼虫的MD-CCTζ基因表达谱的变化。方法:1、MD-CCTζ的序列分析及c DNA克隆、表达。从课题组前期构建的家蝇幼虫EST数据库中筛选得到家蝇的CCTζ基因序列,通过序列分析,预测其开放阅读框,采用BLAST、EXPASY等生物信息学网站分析预测MD-CCTζ基因编码蛋白的结构域,二级及三级结构等;从NCBI上下载其他物种CCTζ基因的氨基酸序列,借助MEGA 6.0软件采用邻接法构建系统进化树;根据其c DNA序列设计引物,PCR扩增MD-CCTζ基因,将目的基因与表达载体PEASY-E1构建重组质粒,转化到大肠杆菌BL21（DE3）中,选择合适温度、时间使用IPTG诱导重组蛋白,重组蛋白使用His·Tag融合蛋白试剂盒纯化。2、家蝇CCTζ基因的时空... 

【文章来源】：贵州医科大学贵州省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

BLAST中MD-CCTζ保守结构域分析

MD-CCTζ蛋白的SignalP-4.1分析结果

MD-CCTζ蛋白的TMHMM分析结果


本文编号：3348798