MiR-92a-3p R +1和miR-92a-1-5p在ox-LDL诱导大鼠VSMC表型转化和增殖中的作用
发布时间：2021-08-23 22:25
目的探讨miR-92a-3pR+1和miR-92a-1-5p在氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）表型转化和增殖中的作用及其与ERK1/2信号通路的相关性。方法分离、培养大鼠VSMC,以ox-LDL（50 mg/L）诱导VSMC,采用ERK1/2特异性抑制剂U0126（10μmol/L）阻断ox-LDL（50 mg/L）诱导VSMC的ERK1/2信号激活,MicroRNA微阵列分析VSMC的miR-92a-3pR+1和miR-92a-1-5p表达,CCK-8法和Brdu流式细胞术检测细胞增殖;免疫荧光法检测VSMC收缩表型标志蛋白SM22α的变化;Western blot检测VSMC的ERK1/2通路信号激活情况（ERK、p-ERK）、表型标志蛋白SM22α、细胞周期相关蛋白（PCNA、cyclin D1、p21、p27）的表达情况。结果 ox-LDL诱导下,VSMC的miR-92a-3pR+1和miR-92a-1-5p表达明显上调,VSMC的ERK1/2磷酸化水平明显增加,SM22α的表...
【文章来源】：中国动脉硬化杂志. 2019,27(11)
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
．原代大鼠平滑肌细胞形态学与免疫荧光鉴定A为普通显微镜下细胞交织融合成“谷峰状”(100×);B为荧光显微镜下α-SMA阳性表达(200×)
92a-1-5p的调控靶基因，发现它们与细胞周期蛋白依赖激酶(CDKs)、Kruppel样因子(KLFs)等密切相关(图3)，但其相关机制有待进一步研究。表1．各组VSMCmiＲ-92a-3p_Ｒ+1和miＲ-92a-1-5p的表达Table1．ComparisonofVSMCmiＲ-92a-3p_Ｒ+1andmiＲ-92a-1-5pexpressionineachgroup分组miＲ-92a-3p_Ｒ+1miＲ-92a-1-5p空白对照组4893．00±169．032．00±0．58ox-LDL组6182．00±306．56a3．33±0．84U0126组3326．00±197．84b0．67±0．73ba为P＜0．05，与空白对照组比较;b为P＜0．05，与ox-LDL组比较。图2．各组VSMC的p-EＲK的表达水平a为P＜0．05，与空白对照组比较;b为P＜0．05，与ox-LDL组比较。Figure2．Expressionofp-EＲKinVSMCofeachgroup2．3ox-LDL对VSMC增殖的影响及其与EＲK1/2通路的关系CCK-8法和Brdu流式细胞术测定细胞增殖(图4、图5)。与空白对照组比较，ox-LDL诱导促进VSMC细胞的增殖(P＜0．05)，PCNA、cyclinD1蛋白表达上调(P＜0．05)，p21和p27蛋白表达减少(P＜0．05);EＲK1/2通路阻断后明显抑制VSMC细胞的增殖，PCNA、cyclinD1蛋白表达降低(P＜0．05)，p21和p27蛋白表达上调(P＜0．05)差异有显著性(P＜0．05;图6)。2．4U0126对VSMC表型转化标记蛋白SM22α表达的影响采用SM22α免疫荧光染色和WB检测发现，SM22α蛋白表达水平较空白对照组下降(P＜0.05);U0126阻断EＲK信号通路后，SM22α蛋白表达水平升高(P＜0．05，图7)。图3．靶基因预测miＲ-92a-3p_Ｒ+1和miＲ-92a-1-5p与VSMC表型转化和增殖相关Figure3．TargetgenesofmiＲ-92a-3p_Ｒ+1andmiＲ-92a-1-5pwerefoundtoberelatedtophenotypictransformationandcellproliferationthroughTargetscan7．2database图4．CCK-8法检测VSMC增殖a为P＜0．0
92a-1-5p的调控靶基因，发现它们与细胞周期蛋白依赖激酶(CDKs)、Kruppel样因子(KLFs)等密切相关(图3)，但其相关机制有待进一步研究。表1．各组VSMCmiＲ-92a-3p_Ｒ+1和miＲ-92a-1-5p的表达Table1．ComparisonofVSMCmiＲ-92a-3p_Ｒ+1andmiＲ-92a-1-5pexpressionineachgroup分组miＲ-92a-3p_Ｒ+1miＲ-92a-1-5p空白对照组4893．00±169．032．00±0．58ox-LDL组6182．00±306．56a3．33±0．84U0126组3326．00±197．84b0．67±0．73ba为P＜0．05，与空白对照组比较;b为P＜0．05，与ox-LDL组比较。图2．各组VSMC的p-EＲK的表达水平a为P＜0．05，与空白对照组比较;b为P＜0．05，与ox-LDL组比较。Figure2．Expressionofp-EＲKinVSMCofeachgroup2．3ox-LDL对VSMC增殖的影响及其与EＲK1/2通路的关系CCK-8法和Brdu流式细胞术测定细胞增殖(图4、图5)。与空白对照组比较，ox-LDL诱导促进VSMC细胞的增殖(P＜0．05)，PCNA、cyclinD1蛋白表达上调(P＜0．05)，p21和p27蛋白表达减少(P＜0．05);EＲK1/2通路阻断后明显抑制VSMC细胞的增殖，PCNA、cyclinD1蛋白表达降低(P＜0．05)，p21和p27蛋白表达上调(P＜0．05)差异有显著性(P＜0．05;图6)。2．4U0126对VSMC表型转化标记蛋白SM22α表达的影响采用SM22α免疫荧光染色和WB检测发现，SM22α蛋白表达水平较空白对照组下降(P＜0.05);U0126阻断EＲK信号通路后，SM22α蛋白表达水平升高(P＜0．05，图7)。图3．靶基因预测miＲ-92a-3p_Ｒ+1和miＲ-92a-1-5p与VSMC表型转化和增殖相关Figure3．TargetgenesofmiＲ-92a-3p_Ｒ+1andmiＲ-92a-1-5pwerefoundtoberelatedtophenotypictransformationandcellproliferationthroughTargetscan7．2database图4．CCK-8法检测VSMC增殖a为P＜0．0
【参考文献】：
期刊论文
[1]MiR-92a通过靶向抑制PTEN的表达促进血管平滑肌细胞的增殖以及迁移[J]. 赵曦雯,张玉梅. 成都医学院学报. 2019(02)
[2]ERK1/2对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞Kv1.5通道表达的影响[J]. 王园园,郑梦晓,赵美平,黄林静,王万铁. 中国应用生理学杂志. 2015(05)
[3]24-乙酰泽泻醇A对ox-LDL诱导大鼠VSMC表型转化的影响及其与ERK1/2通路的关系[J]. 周晓茂,魏伟,陈彤,邓阳阳,薛偕华. 中国动脉硬化杂志. 2015(04)
[4]Mechanisms simultaneously regulate smooth muscle proliferation and differentiation[J]. Ning Shi,Shi-You Chen. The Journal of Biomedical Research. 2014(01)
[5]细胞周期蛋白D与细胞周期调控研究进展[J]. 李峰,陈临溪. 国外医学(生理、病理科学与临床分册). 2005(03)
[6]大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞E1A激活基因阻遏子的表达变化[J]. 韩雅玲,王效增,康建,刘海伟,李少华. 中华心血管病杂志. 2004(01)
硕士论文
[1]MLCK通过miRNA-92a调控血管平滑肌细胞增殖与迁移[D]. 张晨旭.大连医科大学 2016
本文编号：3358699
【文章来源】：中国动脉硬化杂志. 2019,27(11)
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
．原代大鼠平滑肌细胞形态学与免疫荧光鉴定A为普通显微镜下细胞交织融合成“谷峰状”(100×);B为荧光显微镜下α-SMA阳性表达(200×)
92a-1-5p的调控靶基因，发现它们与细胞周期蛋白依赖激酶(CDKs)、Kruppel样因子(KLFs)等密切相关(图3)，但其相关机制有待进一步研究。表1．各组VSMCmiＲ-92a-3p_Ｒ+1和miＲ-92a-1-5p的表达Table1．ComparisonofVSMCmiＲ-92a-3p_Ｒ+1andmiＲ-92a-1-5pexpressionineachgroup分组miＲ-92a-3p_Ｒ+1miＲ-92a-1-5p空白对照组4893．00±169．032．00±0．58ox-LDL组6182．00±306．56a3．33±0．84U0126组3326．00±197．84b0．67±0．73ba为P＜0．05，与空白对照组比较;b为P＜0．05，与ox-LDL组比较。图2．各组VSMC的p-EＲK的表达水平a为P＜0．05，与空白对照组比较;b为P＜0．05，与ox-LDL组比较。Figure2．Expressionofp-EＲKinVSMCofeachgroup2．3ox-LDL对VSMC增殖的影响及其与EＲK1/2通路的关系CCK-8法和Brdu流式细胞术测定细胞增殖(图4、图5)。与空白对照组比较，ox-LDL诱导促进VSMC细胞的增殖(P＜0．05)，PCNA、cyclinD1蛋白表达上调(P＜0．05)，p21和p27蛋白表达减少(P＜0．05);EＲK1/2通路阻断后明显抑制VSMC细胞的增殖，PCNA、cyclinD1蛋白表达降低(P＜0．05)，p21和p27蛋白表达上调(P＜0．05)差异有显著性(P＜0．05;图6)。2．4U0126对VSMC表型转化标记蛋白SM22α表达的影响采用SM22α免疫荧光染色和WB检测发现，SM22α蛋白表达水平较空白对照组下降(P＜0.05);U0126阻断EＲK信号通路后，SM22α蛋白表达水平升高(P＜0．05，图7)。图3．靶基因预测miＲ-92a-3p_Ｒ+1和miＲ-92a-1-5p与VSMC表型转化和增殖相关Figure3．TargetgenesofmiＲ-92a-3p_Ｒ+1andmiＲ-92a-1-5pwerefoundtoberelatedtophenotypictransformationandcellproliferationthroughTargetscan7．2database图4．CCK-8法检测VSMC增殖a为P＜0．0
92a-1-5p的调控靶基因，发现它们与细胞周期蛋白依赖激酶(CDKs)、Kruppel样因子(KLFs)等密切相关(图3)，但其相关机制有待进一步研究。表1．各组VSMCmiＲ-92a-3p_Ｒ+1和miＲ-92a-1-5p的表达Table1．ComparisonofVSMCmiＲ-92a-3p_Ｒ+1andmiＲ-92a-1-5pexpressionineachgroup分组miＲ-92a-3p_Ｒ+1miＲ-92a-1-5p空白对照组4893．00±169．032．00±0．58ox-LDL组6182．00±306．56a3．33±0．84U0126组3326．00±197．84b0．67±0．73ba为P＜0．05，与空白对照组比较;b为P＜0．05，与ox-LDL组比较。图2．各组VSMC的p-EＲK的表达水平a为P＜0．05，与空白对照组比较;b为P＜0．05，与ox-LDL组比较。Figure2．Expressionofp-EＲKinVSMCofeachgroup2．3ox-LDL对VSMC增殖的影响及其与EＲK1/2通路的关系CCK-8法和Brdu流式细胞术测定细胞增殖(图4、图5)。与空白对照组比较，ox-LDL诱导促进VSMC细胞的增殖(P＜0．05)，PCNA、cyclinD1蛋白表达上调(P＜0．05)，p21和p27蛋白表达减少(P＜0．05);EＲK1/2通路阻断后明显抑制VSMC细胞的增殖，PCNA、cyclinD1蛋白表达降低(P＜0．05)，p21和p27蛋白表达上调(P＜0．05)差异有显著性(P＜0．05;图6)。2．4U0126对VSMC表型转化标记蛋白SM22α表达的影响采用SM22α免疫荧光染色和WB检测发现，SM22α蛋白表达水平较空白对照组下降(P＜0.05);U0126阻断EＲK信号通路后，SM22α蛋白表达水平升高(P＜0．05，图7)。图3．靶基因预测miＲ-92a-3p_Ｒ+1和miＲ-92a-1-5p与VSMC表型转化和增殖相关Figure3．TargetgenesofmiＲ-92a-3p_Ｒ+1andmiＲ-92a-1-5pwerefoundtoberelatedtophenotypictransformationandcellproliferationthroughTargetscan7．2database图4．CCK-8法检测VSMC增殖a为P＜0．0
【参考文献】：
期刊论文
[1]MiR-92a通过靶向抑制PTEN的表达促进血管平滑肌细胞的增殖以及迁移[J]. 赵曦雯,张玉梅. 成都医学院学报. 2019(02)
[2]ERK1/2对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞Kv1.5通道表达的影响[J]. 王园园,郑梦晓,赵美平,黄林静,王万铁. 中国应用生理学杂志. 2015(05)
[3]24-乙酰泽泻醇A对ox-LDL诱导大鼠VSMC表型转化的影响及其与ERK1/2通路的关系[J]. 周晓茂,魏伟,陈彤,邓阳阳,薛偕华. 中国动脉硬化杂志. 2015(04)
[4]Mechanisms simultaneously regulate smooth muscle proliferation and differentiation[J]. Ning Shi,Shi-You Chen. The Journal of Biomedical Research. 2014(01)
[5]细胞周期蛋白D与细胞周期调控研究进展[J]. 李峰,陈临溪. 国外医学(生理、病理科学与临床分册). 2005(03)
[6]大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞E1A激活基因阻遏子的表达变化[J]. 韩雅玲,王效增,康建,刘海伟,李少华. 中华心血管病杂志. 2004(01)
硕士论文
[1]MLCK通过miRNA-92a调控血管平滑肌细胞增殖与迁移[D]. 张晨旭.大连医科大学 2016
本文编号：3358699
本文链接：https://www.wllwen.com/xiyixuelunwen/3358699.html
最近更新
教材专著
