长链非编码RNA Gas5通过竞争性结合miR-181c-5p调控细胞自噬的机制研究

发布时间：2021-08-24 09:15

　　目的探究长链非编码RNA Gas5通过竞争性结合miRNAs,调节其自噬靶基因的表达,明确lncRNA Gas5调控RAW264.7细胞自噬的分子机制。方法利用3-甲基腺嘌呤（3-MA）和饥饿（Stravation）条件分别处理细胞建立细胞自噬抑制和细胞自噬模型,实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR）检测各处理组中lncRNA Gas5的表达量;构建lncRNA Gas5过表达与敲除细胞模型,通过western blot、激光共聚焦和透射电镜分别检测自噬标志蛋白LC3和自噬小体的形成与数量的变化情况,发现lncRNA Gas5对RAW264.7细胞自噬的调控影响;生物信息学分析预测lncRNA Gas5靶向的mi RNAs及其自噬相关靶基因,确定miR-181c-5p及其靶基因Atg5作为研究对象;分别构建Gas5-wt/mut和Atg5 3’UTR-wt/mut重组报告载体,通过检测荧光素酶活性的变化并结合qRT-PCR检测来验证miR-181c-5p对lncRNA Gas5及Atg5的靶向调控作用;通过qRT-PCR检测lncRN... 

【文章来源】：宁夏医科大学宁夏回族自治区

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
中英文缩略词表
前言
第一部分 LncRNAGas5对RAW264.7细胞自噬的影响
    材料与方法
    结果
    讨论
第二部分 LncRNAGas5靶基因的预测及靶向关系的验证
    材料与方法
    结果
    讨论
第三部分 LncRNAGas5竞争性结合miR-181c-5p对细胞自噬的调控
    材料与方法
    结果
    讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
致谢
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个人简介
开题、中期及学位论文答辩委员组成


【参考文献】：
期刊论文
[1]Non-coding RNAs and Their Roles in Stress Response in Plants[J]. Jingjing Wang,Xianwen Meng,Oxana B.Dobrovolskaya,Yuriy L.Orlov,Ming Chen.  Genomics,Proteomics & Bioinformatics. 2017(05)
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本文编号：3359715