衍生化HPLC/MS法测定有机羧酸物质的研究进展

发布时间：2021-08-30 10:58

　　利用高效液相色谱-质谱联用（HPLC/MS）法对体液中微量的羧酸化合物进行定量检测仍然是一个难题。近年的研究显示采用衍生化质谱增敏法成为解决这一问题的重要方法。本文综述了近年来应用此类方法测定微量羧酸物质的研究,并对研究中所采用的衍生化试剂和化学反应进行了总结。 

【文章来源】：药学研究. 2019,38(11)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

羧酸类物质与DMT－1(S)－Apy或DMT－3(S)－Apy的反应ShoujiroOgawa课题组还开发了一种新的衍生化试剂(S)(二甲氨基苯基羰基)氨基吡啶()对手性

－甲基吗啉存在下，与羧酸［3－羟基吡啶酸(3－OH－PA)，2－(－羧乙基－6－羟基三甲基色曼(γ－CEHC)］和依托多酸反应迅速，形成酰胺键［6］。结果表明，ANA－衍生物在ESI－MS正离子模式具能高度响应，在MS/MS中产生特征产物离子，从而可以通过选择性的反应监测进行灵敏的检测。ANA－衍生物的测定响应比全羧酸提高了20～160倍，检出限在低浓度微孔范围(1．8～11fmol)。图3羧酸类物质与DMT－1(S)－Apy或DMT－3(S)－Apy的反应图4手型羧酸与ANA的反应ShoujiroOgawa课题组还开发了一种新的衍生化试剂(S)－1－(4－二甲氨基苯基羰基)－3－氨基吡啶(1－DADAP)对手性羧酸在LC/MS中检出和分离(见图5)。不同于衍生化前的低灵敏度，低分离效果，1－DAPAP在4－(4，6－二甲氧基－1，3，5－三嗪－2－酰基)－4－甲基吗啉存在下，与羧酸在室温下反应5min。所得衍生物含有酰胺键，它在ESI－MS正离子模式下响应剧烈，在MS/MS中产生特征产物离子，使选择性反应监测的灵敏度提高。1－DAPAP－衍生物的检测响应比完整的羧酸在柱上提高10～1100倍，检测范围分别为0．97fmol。图5手型羧酸与1－DADAP的反应利用ANA和1－DAPAP衍生化对手性羧酸的拆分都是有效的。尤其是1－DAPAP的衍生化对羧酸的拆分值为1．243，该衍生化方法能够成功地应用于生物样品分析。在实际应用中，经过衍生化后，人唾液中微量布洛芬和萘普生可以在LC/ESI－MS/MS得到很好的分离和检测，并且具有操作简单，样品用量小而灵敏度高的优点［7］。Noortj

用4－BNMA后的6min内，原羧酸浓度在0．2～44μg之间的检测限可以提高2～3倍。该方法已成功应用于体内外模型。2通过其他化学键进行衍生化TaoMa课题组在2015年开发了一种衍生化试剂2－(5－苯并吖啶)乙基－对甲苯磺酸酯［10］(BAETS)用来测定药材中三萜酸的含量。通过ＲP－HPLC－FLD－MS柱前衍生化法使用这种试剂可以同时测定5种三萜酸:积雪草酸、山楂酸、科罗索酸、齐墩果酸和桦木酸。这个方法有利于更好地鉴定化学成分(见图8)。图6唾液酸与EPC的反应图7羧酸类物质与4－BNMA的反应图8三萜酸与BAETS的反应Xian－EnZhao课题组在2016年设计了衍生化试剂4－羰基氯罗沙明(CCＲ)来分析神经递质(NTs)的含量。NTs可能在神经退行性疾病如阿尔茨海默病(AD)中发挥重要作用。为了研究它与疾病间潜在的联系，Xian－EnZhao开发了一个新的简单、快速、准确基于原位超声辅助衍生化分散的灵敏分析方法。将液－液微萃取(原位UA－DDLLME)与UPLC－MS/MS相结合，用此方法成功进行了AD大鼠尿液中的氨基酸神经递质(AANT)和单胺神经递质(MANTs)的定量分析(见图9)。因为未经衍生化处理的NTs存在于生物样品中浓度低，化学性质不稳定，并且还存在共洗脱的潜在色谱干扰。所以在一个步骤中同时进行衍生化和分析物的微萃取可以简化分析样品提取步骤，减少样品和溶剂的消耗，提高灵敏度。这是一种在以前没有用于生物样品中NTs的分析手段。CCＲ用于分析NTs时有衍生条件温和，易于处理和检测灵敏度高等优点［11］。这种方法可能是阿尔茨海?


本文编号：3372651