TauT转基因大鼠的构建及鉴定

发布时间：2021-09-05 18:48

　　目的:为研究牛磺酸转运体（TauT）在神经系统疾病中的作用,构建并繁育脑特异性表达TauT转基因模型大鼠(TauT^+/-大鼠)。方法:将TAUT c DNA插入脑特异性PDGF启动子下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立TAUT转基因大鼠。Genotype鉴定转基因大鼠的基因型。经过配种繁殖和鉴定后,绘制2～8月龄生长曲线、测定各脏器质量、脏体系数和脏脑系数;RT-PCR技术检测TauT^+/-大鼠大脑组织中Slc6a6 mRNA基因表达水平;Western blot检测TauT^+/-大鼠在大脑、心、肝组织的TauT蛋白表达,并对TauT^+/-大鼠大脑组织进行免疫组化染色和HE染色,IPP软件对免疫组化图像进行处理。结果:成功构建PDGF-Slc6a6表达质粒,得到3只TauT^+/-大鼠F0代。经过繁殖和鉴定,与同窝阴性大鼠（TauT-/-大鼠）比较,TauT^+/-大鼠大脑组织Slc6a6 mRNA基因表达水平显著升高,大脑、心、肝组织TauT蛋白表达水平... 

【文章来源】：天津医科大学学报. 2020,26(01)

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

PDGF-Slc6a6重组质粒构建

TauT+/-大鼠DNA PCR鉴定

如图5～7,RT-PCR结果表明TauT+/-大鼠在大脑组织中的Slc6a6基因mRNA表达水平较TauT-/-大鼠显著升高（P<0.05），融解曲线显示只有内参基因GAPDH和Slc6a6基因的融解峰，扩增产物分别在81℃和85℃时出现单一峰，扩增特异性较好。图4 2～8月TauT+/-大鼠体质量生长曲线

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3385888