不同培养条件下鼠疫菌PhoP/PhoQ的自调控模式研究

发布时间：2021-09-28 21:59

　　目的研究鼠疫耶尔森菌PhoP/PhoQ在不同培养条件下的自调控关系。方法 PCR扩增YPO1635启动子区DNA序列,并克隆入pRW50质粒β-半乳糖苷酶基因的上游,构建LacZ重组质粒,进而将该重组质粒转入鼠疫菌野生株（WT）和phoP突变株（ΔphoP）中,通过测定二者中β-半乳糖苷酶活性差异来判定PhoP对YPO1635的调控关系。提取WT和ΔphoP的总RNA,采用引物延伸实验研究phoP的转录起始位点,并根据产物的丰度判断PhoP对phoP的调控关系。结果 LacZ结果表明,在低Mg²⁺TMH和BHI培养基中,PhoP能激活YPO1635的转录,而在高Mg²⁺TMH中,PhoP对YPO1635的转录无调控作用。引物延伸结果显示,phoP有两个转录起始位点G（-90）和A（-118）（分别记为P1和P2,翻译起始位点为+1）,在低Mg²⁺TMH中,PhoP能激活P1的转录,而对P2无调控作用;在高Mg²⁺TMH中,PhoP对二者均无调控作用;在BHI中,PhoP对二者的转录均具抑制作用。结论... 

【文章来源】：军事医学. 2017,41(05)北大核心CSCD

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌株和质粒
        1.1.2 主要试剂
    1.2 鼠疫菌培养
        1.2.1 在H-TMH或BHI中培养方式[12, 13]
        1.2.2 在L-TMH中培养方式[13]
    1.3 Lac Z报告基因融合实验
    1.4 引物延伸实验
    1.5 统计学处理
2 结果
    2.1 Pho P对YPO1635的调控
    2.2 Pho P对自身基因的调控
    2.3 pho PQ操纵子结构
3 讨论



本文编号：3412604