流感病毒A/PR/8/34重配母本株高免疫原性HA蛋白制备及鉴定

发布时间：2021-10-01 06:05

　　制备流感病毒经典重配过程中所需的A/PR/8/34母本株血凝素蛋白（Hemagglutinin,HA）抗血清。A/PR/8/34流感病毒灭活纯化后经菠萝蛋白酶消化。5%²0%蔗糖连续密度梯度离心法纯化HA蛋白。单向免疫扩散法（Single Radial Immunodiffusion,SRID）筛选目的蛋白。SDS-PAGE法鉴定目的蛋白。纯化的A/PR/8/34 HA蛋白免疫兔子制备抗血清,血凝抑制试验（Hemoglutination Inhibition Assay,HI）测定HA抗血清效价,经SRID法鉴定HA抗血清纯度。成功制备了高免疫原性A/PR/8/34HA蛋白;兔抗血清HI滴度可达10240,SRID法鉴定为高纯度HA抗血清。制备了流感病毒经典重配中关键试剂,摸索成功整套技术方法,为我国自主研发季节性流感疫苗株奠定了基础。 

【文章来源】：病毒学报. 2016,32(02)北大核心CSCD

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
材料与方法
    1主要试剂、仪器和实验动物
    2病毒及抗血清
    3病毒制备
    4鉴定用全病毒抗血清最佳检测浓度的确定
    5 HA蛋白的制备和鉴定
    6 HA蛋白抗血清制备
    7 HA蛋白抗血清HI法测定
    8 HA蛋白抗血清SRID法测定
结果
    1鉴定用全病毒抗血清最佳检测浓度确定
    2 HA蛋白的制备
    3 HA蛋白的鉴定
        3.1 SRID法鉴定
        3.2 SDS-PAGE法鉴定
    4 HA蛋白抗血清HI法测定
    5 HA蛋白抗血清SRID法鉴定
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]季节性流感疫苗株制备技术平台的建立[J]. 辛丽,鲁健,陈永坤,唐静,郭俊峰,王大燕,舒跃龙.  中华实验和临床病毒学杂志. 2015 (02)



本文编号：3417292