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EV71病毒激活PI3K/Akt通路抑制JNK介导细胞凋亡的分子机制

发布时间:2021-10-07 06:26
  肠道病毒71型(EV71)是引起婴幼儿手足口病的一种重要病原病毒,其属于小RNA病毒科,肠道病毒属(Enterovirus)成员,是一种无囊膜的正链RNA病毒。EV71病毒基因组大小约为7400个核苷酸,编码4个结构蛋白和7个非结构蛋白,在EV71病毒感染过程中,时常会诱导宿主细胞凋亡进而抑制病毒的复制。而另一方面,EV71病毒会激活宿主细胞的抗凋亡通路,比如PI3K/Akt信号通路,抑制细胞凋亡而帮助病毒完成生命周期。然而截至目前,在EV71病毒感染过程中,细胞凋亡和PI3K/Akt信号通路的相互作用关系尚不清楚。因而本研究综合运用Western Blot、免疫荧光技术、流式细胞术、免疫共沉淀技术、基因沉默、药物阻断等实验方法,系统研究EV71病毒感染对PI3K/Akt通路的影响;EV71病毒感染对线粒体细胞色素C释放的影响;EV71病毒感染对细胞质Bax蛋白迁移转运的影响;EV71病毒感染对JNK介导细胞凋亡的影响;EV71感染细胞后,PI3K/Akt通路对细胞凋亡的影响;以及EV71病毒感染后,PI3K/Akt对JNK通路的影响,最终阐明EV71病毒激活PI3K/Akt信号通路抑... 

【文章来源】:黑龙江八一农垦大学黑龙江省

【文章页数】:62 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
英文摘要
1 文献综述
    1.1 手足口病
    1.2 肠道病毒71型
    1.3 EV71病毒颗粒结构
    1.4 EV71病毒基因组结构
    1.5 EV71病毒基因分型
    1.6 EV71病毒复制
    1.7 应激颗粒参与EV71病毒复制与信号转导
    1.8 EV71激活PI3K/Akt信号通路
    1.9 研究的目的和意义
2 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 细胞与病毒
        2.1.2 抗体和抑制剂
        2.1.3 主要仪器和耗材
    2.2 实验方法
        2.2.1 SiRNA和瞬时转染
        2.2.2 亚细胞成分的分离
        2.2.3 免疫共沉淀和Western Blot分析
        2.2.4 免疫荧光检测
        2.2.5 流式细胞术分析
3 结果与分析
    3.1 EV71病毒感染激活RD细胞PI3K/Akt通路
    3.2 EV71病毒感染诱导细胞色素C的释放
    3.3 EV71病毒感染诱导Bax蛋白的转位和活化
    3.4 JNK激活促进EV71病毒诱导的细胞凋亡
    3.5 抑制PI3K/Akt通路增强细胞凋亡
    3.6 PI3K/Akt通路通过促进磷酸化ASK1而抑制JNK通路的激活
4 讨论
    4.1 抑制凋亡模式图
    4.2 抑制凋亡分析
    4.3 总结
5 结论
参考文献
致谢
附录
个人简历



本文编号:3421527

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