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PKA调节亚基对烟曲霉自噬的影响

发布时间:2021-10-19 15:52
  目的:烟曲霉(Aspergillus fumigatus,A.fumigatus)是一种常见的通过空气传播的条件性致病丝状真菌,常存在于高温堆肥和腐烂植物中,对其生存环境的扰动会释放大量的分生孢子(conidia),导致免疫能力低下的人易患侵袭性曲霉病(Invasive aspergillosis,IA),甚至危及生命。自噬作为另一种程序性细胞死亡,与凋亡有显著的区别。“自噬性细胞死亡”在形态学上存在突出特点是细胞质产生大量自噬液泡(autophagic vacuolization of the cytoplasm)。自噬在酵母和哺乳动物细胞中广泛研究,酵母是单细胞生物,哺乳动物是复杂的高级多细胞生物,而丝状真菌作为低级多细胞模式生物,其自噬研究尚少,但逐渐引起重视。对烟曲霉的自噬研究结果显示:EDTA可以诱导烟曲霉的自噬,包括液泡的大量形成,产生自噬颗粒;atg1基因敲除使菌丝自噬颗粒消失,在营养缺乏培养基失去菌丝延伸能力;在饥饿状态,ATG8蛋白在野生菌株液泡中累积,atg1基因敲除使ATG8蛋白不能在液泡中累积。在真核生物中,c AMP信号通路参与多种调节过程,且已有研究证明这一... 

【文章来源】:青岛大学山东省

【文章页数】:50 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
引言
材料和方法
    1 实验菌株和动物
    2 实验试剂
    3 实验设备及仪器
    4 实验方法
        4.1 存活率的检测
        4.2 烟曲霉自噬体的形态学观察
        4.3 MDC染色法对自噬体进行染色
        4.4 Real-timePCR法检测自噬相关基因的表达
        4.5 营养缺乏时,菌丝延伸能力的检测
        4.6 Westernblot法检测烟曲霉感染的小鼠LC3-Ⅱ蛋白表达水平
    5 统计学处理
结果
    1 pkaR敲除降低烟曲霉存活率
    2 形态学观察pkaR敲除对烟曲霉自噬的影响
    3 MDC染色观察pkaR敲除对烟曲霉自噬体的影响
    4 pkaR敲除提高烟曲霉Afatg1的mRNA水平
    5 pkaR敲除提高烟曲霉Afatg8的mRNA水平
    6 pkaR敲除提高烟曲霉Afatg11的mRNA水平
    7 pkaR敲除对烟曲霉菌丝延伸能力的影响
    8 烟曲霉感染小鼠LC3-Ⅱ蛋白表达水平检测
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]青蒿琥酯治疗肺烟曲霉感染自噬机制[J]. 戴京京,王丹丹,周武碧,刘敏.  中国微生态学杂志. 2018(02)



本文编号:3445170

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