一氧化氮抑制T细胞产生细胞因子但促进单核细胞细胞因子的分泌

发布时间：2021-10-30 19:58

　　目的研究一氧化氮（nitric oxide,NO）对T细胞和单核细胞分泌细胞因子的作用及机制。方法用抗人CD3抗体或抗人CD3抗体联合抗人CD28抗体或LPS刺激培养外周血单个核细胞（PBMCs）、纯化T细胞或纯化单核细胞,加或不加一氧化氮培养,ELISA检测培养细胞上清液中细胞因子的含量;流式细胞术检测T细胞表面活化分子CD69和CD25的表达、T-box转录因子（T-bet）的表达,STAT1和STAT4的磷酸化程度以及T细胞的分裂情况。结果一氧化氮呈时间和剂量依赖方式抑制T细胞产生IFN-γ、TNF-α和IL-2,但促进单核细胞IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌,且不诱导细胞的凋亡。进一步研究发现其抑制细胞晚期活化分子的表达和细胞的分裂,以及抑制T细胞相关转录因子T-bet的表达,但不抑制STAT1和STAT4的磷酸化程度。结论一氧化氮通过非细胞毒性作用抑制活化的T细胞产生细胞因子,但促进活化的单核细胞的细胞因子的分泌,其机制是通过抑制转录因子T-bet信号通路而抑制T细胞细胞因子的分泌,该研究将为临床应用提供理论依据。 

【文章来源】：免疫学杂志. 2019,35(12)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 PBMCs分离、培养和淋巴细胞纯化
    1.3 ELISA
    1.4 ELISPOT
    1.5流式细胞术
    1.6 CFSE染色法检测T细胞的分裂
    1.7 AnnexinⅤ-FITC/PI试剂盒检测外周血中细胞凋亡
    1.8 统计学分析
2 结果
    2.1 一氧化氮呈浓度和时间依赖抑制人PBMCs的IFN-γ、TNF-α和IL-2分泌
    2.2 一氧化氮对人PBMCs的凋亡无促进作用
    2.3 一氧化氮抑制PBMCs产生细胞因子的半最大效应浓度（EC50)
    2.4一氧化氮抑制T细胞的细胞因子，但促进单核细胞的细胞因子产生
    2.5 一氧化氮抑制T细胞相关转录因子T-bet的表达
    2.6 一氧化氮抑制纯化T细胞CD25但对CD69的表达无影响
    2.7一氧化氮抑制CD4+和CD8+T细胞的分裂
3 讨论



本文编号：3467336