加味散偏汤对硝酸甘油致偏头痛模型大鼠行为症状及NO，NOS，CGRP含量的影响

发布时间：2017-05-06 12:08

  本文关键词：加味散偏汤对硝酸甘油致偏头痛模型大鼠行为症状及NO，NOS，CGRP含量的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的1.观察不同剂量下的加味散偏汤对硝酸甘油致大鼠偏头痛模型行为学的影响。2.研究对硝酸甘油致偏头痛大血浆NO,NOS,CGRP及三叉神经脊束核NOS_1、CGRP含量的影响。3.探讨加味散偏汤的镇痛作用及作用机制;为加味散偏汤治疗偏头痛病提供坚实的理论依据。方法1.将大鼠分为空白组、模型组、加味散偏汤高、中、低剂量组、舒巴坦组,以加味散偏汤高、中、低剂量(35.64,17.82,8.91g·kg~(-1)·d~(-1))连续灌胃给药5天。硝酸甘油致偏头痛大鼠实验,末次给药30min后,出空白组以95%的乙醇2mlg·kg~(-1)皮下注射外,其余各组均ih硝酸甘油10mg·kg~(-1),复制大鼠偏头痛模型。2.模型行为学的测定耳红观察大鼠造模后耳红出现和消失的时间。挠头从造模之时起,每30min作为1个时间段,从造模开始起以持续时间分段计数的方法观察大鼠造模后,在每一个时间段里挠头的次数。连续观察5个时间段,分别记录4个时间段的挠头总数。3.血浆NO、NOS及CGRP水平检测:大鼠皮下注射硝酸甘油注射剂4h后,麻醉,用注射器腹主动脉采血,分离血浆,测定CGRP及NO、NOS水平。血浆CGRP检测严格按放射免疫试剂盒操作说明书进行。NO和NOS_1水平以可见光分光光度计法测定,按试剂盒说明书进行操作。4.三叉神经脊束核NOS_1、CGRP表达的检测:采血后对大鼠行主动脉插管,剪开右心耳,灌入含4%多聚甲醛的0.1 mol/LPBS至肝脏变硬,肢体僵直。取出大鼠脑干和延髓尾段放入甲醛溶液中过夜。石蜡包埋后大鼠脑干和延髓尾段,连续冠状切片,隔5张取一张。切片脱蜡至水,柠檬酸抗原修复,切片,加抗体。在10倍物镜下观察每张切片的NOS_1、CGRP、阳性细胞,用德国Lecia显微照相系统采集图像和分析,荧光镜下呈红色的为阳性细胞,记录各组图像阳性细胞数。结果1.对偏头痛大鼠耳红出现与消失时间的影响。空白组未出现耳红的症状,其余各组大鼠在10min左右均出现耳红症状,且与模型组相比加味散偏汤高、中剂量组能明显减缓耳红出现时间,与舒马普坦组比较加味散偏汤高、中低剂量组能显著缩短大鼠耳红消失时间(P0.01),且中剂量组作用更为显著。2.对硝酸甘油致偏头痛大鼠挠头次数的影响。注射硝酸甘油造模后,30min内各组大鼠挠头次数均较空白组明显增加(P0.01),且各组挠头次数无显著差异,表明造模成功。给药60min后,加味散偏汤高、中、低剂量组与模型组比较,挠头次数均显著减少(P0.01),与模型组比较,加味散偏汤高、中、剂量组以高剂量组作用最强(P0.01)。3.加味散偏汤对偏头痛大鼠血浆中NO、NOS、CGRP含量的影响。造模后,大鼠血浆中的NO,NOS,CGRP与空白对照组明显升高(P0.01),差异有统计学意义。与模型组比较,加味散偏汤高、中、低剂量组均能不同程度的抑制NO,NOS,CGRP的增加(P0.01),与模型组比较,加味散偏汤以高、中剂量组显著(P0.01)。4.加味散偏汤对三叉神经脊束核NOS_1、CGRP细胞数表达的影响。与空白组相比,经免疫荧光法染色后发现模型组三叉神经脊束核NOS_1和CGRP阳性细胞数较空白组明显增加(P0.05,P0.01),加味散偏汤高、中、低剂量组比模型组三叉神经脊束核NOS_1和CGRP阳性细胞数显著减少(P0.01)。结论1、加味散偏汤可有效缩短偏头痛大鼠耳红消失的时间,减少偏头痛大鼠模型的挠头次数,表明本方能有效缓解偏头痛大鼠的临床症状。2、加味散偏汤可降低偏头痛大鼠模型血浆中NO,NOS,CGRP的含量并抑制三叉神经脊束核神经递质NOS_1和CGRP的激活,从而对抗血管活性物质和神经递质的失常,调节脑及血管功能的紊乱。
【关键词】：加味散偏汤 偏头痛 行为学症状 一氧化氮 一氧化氮合酶 降钙素元相关肽
【学位授予单位】：河南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 中英文缩略词表4-6
• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 实验一 加味散偏汤对硝酸甘油致大鼠偏头痛模型行为学的影响13-16
• 材料与方法13-14
• 1 材料13
• 2 方法13-14
• 结果14-16
• 实验二 加味散偏汤对硝酸甘油致大鼠偏头痛模型血浆NO,NOS,CGRP含量的影响16-19
• 材料与方法16-17
• 1 材料16-17
• 2 方法17
• 结果17-19
• 实验三 加味散偏汤对硝酸甘油致大鼠偏头痛模型三叉神经脊束核NOS_1、CGRP阳性细胞数的影响19-22
• 材料与方法19-20
• 1 材料19
• 2 方法19-20
• 结果20-22
• 讨论22-30
• 1 立法思想22-25
• 2 本研究的动物模型、各项实验指标的确立思路25-27
• 3 加味散偏汤对大鼠偏头痛模型作用机制的探讨27-28
• 4 加味散偏汤对预防性治疗偏头痛的探讨28-29
• 5 存在的问题与展望29-30
• 结论30-31
• 致谢31-32
• 参考文献32-35
• 附录35-44
• 附录1 免疫荧光图片35-37
• 附录2 文献综述37-44
• 参考文献42-44
• 附录3 在校期间参编著作及论文与科研44

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本文编号：348363