miR-34a通过靶向Nampt调控大鼠骨髓间充质干细胞衰老的作用研究

发布时间：2021-11-10 06:11

　　生物体的衰老,作为一种复杂的生物学过程,实际上是由于自身的干细胞衰老而引起的。间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）是具有独特优势的成体干细胞,现已成为以干细胞为基础的治疗策略中不可或缺的重要种子细胞,对维持组织稳态和再生能力必不可少。然而,MSCs在个体自然老化过程中以及体外培养过程中也会发生衰老。因此,延缓或逆转MSCs衰老是亟待研究与探索的重大科学问题。前期工作中我们发现,在体外MSCs复制性衰老模型中,烟酰胺磷酸核糖转移酶（Nicotinamide phosphoribosyltransferase,Nampt）可以通过介导细胞内的NAD⁺合成和Sirt1活性影响MSCs衰老,我们将其称之为Nampt-NAD⁺-Sirt1轴。Nampt是延缓MSCs衰老的重要调控因子。那么,哪些因素参与调控Nampt从而影响MSCs衰老呢?MSCs衰老,不仅受遗传学调控,也受控于表观遗传学。作为表观遗传学调控的重要机制之一,微小核糖核酸（microRNA,miRNA）参与调节机体多种生物学过程,如细胞增殖与分化、细胞衰... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

自然衰老大鼠模型的评估A.1-2月龄（年轻组,Young,Y）及15-18月龄（衰老组,Old,O）Wistar大鼠

图 2 各组 MSCs 的形态学特征A.相差显微镜观察（Bar=50μm） B.细胞表面积 C.细胞长宽比1.2.2 细胞 SA-β-gal 活性检测衰老细胞所特有的 β-半乳糖苷酶在底物 X-Gal 的催化下会生成深蓝色的产。如图 3A 所示，P3MSCs 中仅存在少数的蓝染细胞，而 P10MSCs 和 OMSCs深蓝染的阳性细胞数目明显增多。定量分析后发现，与 P3MSCs 相比，P10MSCs OMSCs 中蓝染的阳性细胞比率明显增加（P<0.01，图 3B），即衰老细胞显著加。因此，后续实验中我们以 P3MSCs 为年轻细胞，P10MSCs 为复制衰老细，OMSCs 为自然衰老细胞（ 所示即为衰老细胞）。

第 2 章 实验研究3.2 衰老 MSCs 中 miR-34 Family 的表达miR-34 Family 共包括 miR-34a，miR-34b 和 miR-34c 三个家族成员。应用RT-qPCR 检测 miR-34 Family 的表达情况。结果显示，在 MSCs 自然衰老模型中，与年轻细胞 YMSCs 相比，自然衰老细胞 OMSCs 中 miR-34 Family 成员的表达均明显上调（图 4A），其中以 miR-34a 的表达上调最为显著（P<0.01）；在 MSCs复制性衰老模型中，与年轻细胞P3MSCs相比，复制衰老细胞P12MSCs中miR-34Family 成员的表达也均增加（图 4B），miR-34a 的表达上调也最为明显（P<0.01）。因此，后续实验中我们将焦点关注于 miR-34a。


本文编号：3486732