抗凋亡基因对单克隆抗体瞬时表达的影响

发布时间：2021-11-28 08:53

　　背景和目的:在生物制药领域,蛋白类药物正处在迅猛发展时期。据Drug Bank2017年发布的最新数据表明,有5028种试验药物和4775种非冗余蛋白（如药物靶点、酶、转移介质、药物载体等）序列等待进一步的评估。日益增长的需求使得优化CHO细胞表达系统以高效生产蛋白药物尤为重要。近年来,瞬时表达技术凭借其时间短、费用低、产物符合临床标准的优势,逐渐得到重视和发展。在规模化细胞培养过程中,细胞凋亡与细胞存活状态、产物质量息息相关。因此,通过过表达抗凋亡基因以延缓细胞凋亡、改善细胞生长状态是降低单克隆抗体生产成本的策略之一。此外,据文献报道,影响自噬途径从而延缓细胞死亡也是重要的方法之一。有研究表明,自噬诱导剂rapamycin可以延长CHO细胞存活时间,影响稳定表达抗体的细胞株的产量。anti-PD1单克隆抗体现已被广泛应用于临床,临床上目前证实其可以治疗6种癌症。市场上,已经有三家公司获得FDA批准,可以在市场上销售anti-PD1单克隆抗体。其它追随者也处在对这种抗体的不同的研究发展阶段。故而,以anti-PD1为例,研究提高其表达量的方法具有一定的意义。本文介绍了一种通过共转染瞬时... 

【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

瞬时表达与稳定表达的步骤流程图

由自噬有关蛋白（Atgs）调控。自噬发生的膜动态变化如图1.2 所示。图 1.2 自噬的膜动态变化[39]Fig.1.2 Membrane dynamics of autophagy in yeast and mammals

图 2.1 转染效率优化结果Fig.2.1 Optimization of transfection efficiency in 3D plot showing the transfectionefficiencies in CHO cells at different DNA: PEI ratios, DNA concentrations and cellconcentrations.3.2 抗凋亡基因质粒构建


本文编号：3524114