双波长微孔板赖氏法检测人血浆丙氨酸氨基转移酶含量的方法学验证

发布时间：2021-12-11 04:42

　　目的采用双波长（492 nm/630 nm）微孔板赖氏法检测人血浆中丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase, ALT）的含量,并对该方法进行系统性的评价。方法按照ALT测定试剂盒的要求加样,应用双波长（492 nm/630 nm）微孔板赖氏法测定人血浆中的ALT含量,并对检测系统的专属性、线性范围、准确度和精密度进行验证。结果专属性分析结果显示,血浆样品与不同比例的抗凝剂混合,其中的ALT均能有效被检出,回收率分别为100%、95%和90%;对28和150个单位丙酮酸钠标准溶液进行倍比稀释5个梯度以制作标准曲线,采用多项式对标准曲线进行拟合,结果显示丙酮酸钠标准溶液分别在9.375～150、1.75～28和1.75～150个单位范围内线性关系均良好,相关系数r均达到0.99以上;准确度检测结果显示,已知含量的厂家质控血清和国家能力验证样品的实测值和理论值相比,回收率均在90%～110%之间;同一样品,重复加样18孔,重复性检测结果变异系数（CV）为5.29%;两位试验人员在不同日期对同一样品重复测定6次,中间精密度检测结果变异系数为5.49%。结论该检测方法... 

【文章来源】：微生物学免疫学进展. 2020,48(01)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

第一板加样情况

确认血液制品生产用人血浆ALT赖氏法-微孔板测定的准确性是否符合要求。选择已知含量的质控血清20160612和能力验证样品(1671、1672、1673、1674、1675),每份样品重复加样3孔,计算CV,CV应<10%;并将实测值与理论值比较,回收率应在90%～110%。加样位置见图2。1.7 精密度

表2 线性范围确认检测结果Tab.2 Confirmation test for linear range 丙酮酸钠标准溶液理论含量/卡门单位 A492 nm/630 nm 值 均值 CV/% 1 2 3 150 0.840 0 0.845 3 0.843 5 0.8429 0.32 75 0.652 2 0.650 3 0.650 7 0.651 1 0.15 37.5 0.520 0 0.515 0 0.516 7 0.517 2 0.49 18.75 0.452 3 0.457 3 0.449 0 0.452 9 0.92 9.375 0.420 0 0.415 8 0.418 3 0.418 0 0.51 28 0.493 7 0.497 5 0.496 8 0.496 0 0.41 14 0.438 3 0.437 5 0.437 1 0.437 6 0.14 7 0.410 4 0.407 3 0.405 7 0.407 8 0.59 3.5 0.388 1 0.391 2 0.391 1 0.390 1 0.45 1.75 0.379 9 0.380 2 0.380 7 0.380 3 0.112.3 准确度

【参考文献】：
期刊论文
[1]双波长微板赖氏法检测丙氨酸氨基转移酶方法的优化[J]. 郝春玉,叶小书,袁攀,曾浪霞,牟嘉炜,何学新,段艳,张燕.  中国生物制品学杂志. 2017(02)
[2]ALT微量赖氏法中NaOH浓度的选择与应用[J]. 徐鹤新.  中国输血杂志. 2004(04)
[3]微量滴定板改良赖氏试管法检测血浆丙氨酸氨基转移酶[J]. 韩晓忠,宋青,耿凤军.  中国生化药物杂志. 2004(01)
[4]双波长微板赖氏法自动化检测ALT的研究[J]. 邢培清,刘玉振,方建华,温涛,李伍升.  河南医学研究. 2002(04)



本文编号：3534028