三磷酸腺苷对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响及机制研究

发布时间：2021-12-11 05:01

　　目的探讨三磷酸腺苷（Adenosine triphosphate,ATP）对骨髓间充质干细胞（BMSCs）向软骨细胞分化的影响及其作用机制。方法取4～5周龄SD大鼠的BMSCs,体外培养至第3代。以PNPP法检测不同浓度ATP（150μmol/L、300μmol/L、600μmol/L）及BBG（P2X7受体抑制剂）对BMSCs碱性磷酸酶表达的影响。采用RT-PCR和real time PCR法检测ATP及BBG对BMSCs多个成软骨诱导指标mRNA表达的影响。结果加入ATP后,BMSCs碱性磷酸酶表达明显增加（P<0.05）,其中ATP浓度为150μmol/L和300μmol/L时碱性磷酸酶表达量最高（P<0.05）;多个成软骨指标,如SOX6、SOX9及COL2A1等的表达水平提高（P<0.05）;加入P2X7受体抑制剂后,ATP对碱性磷酸酶的促进作用降低（P<0.05）,成软骨指标SOX6、SOX9及COL2A1等的表达亦明显减少（P<0.05）。结论一定浓度的ATP对BMSCs向软骨细胞分化具有促进作用,可能是通过介导P2X7受体而发挥作用。 

【文章来源】：组织工程与重建外科杂志. 2019,15(06)

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

BMSCs镜下观察及P2X7受体表达

不同浓度ATP处理BMSCs 3 d后，采用碱性磷酸酶试剂盒对BMSCs碱性磷酸酶表达情况的检测结果显示，ATP处理后BMSCs碱性磷酸酶表达显著升高，其中ATP浓度为150μmol/L和300μmol/L时碱性磷酸酶表达量最高（P<0.05），两种浓度组间对比无统计学差异（P>0.05）。因此，后续研究均采用300μmol/L为ATP效应浓度（图2）。2.3 ATP对BMSCs成软骨指标表达的影响

RT-PCR检测ATP处理3 d后的BMSCs成软骨指标，成软骨诱导培养组为阳性对照。结果表明，ATP可促进多个成软骨指标表达上升，但与阳性对照相比效果较弱（图3）。2.4 BBG抑制ATP对BMSCs促分化作用

【参考文献】：
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化[J]. 陈亮,何少茹,庄建,郑曼利,孙云霞,梁穗新,刘玉梅,孙新,陈晓博.  中国组织工程研究. 2013(27)



本文编号：3534055