碳纳米管/SYBR Green I荧光探针在沙门氏菌检测中的应用

发布时间：2021-12-11 07:16

　　纳米晶体、纳米管等无机材料具有特殊的结构特征,在一些小分子（核酸或蛋白质）的检测中显示出很好的性能。单壁碳纳米管（SWNTs）能够与寡核苷酸的碱基通过π-π非共价键作用形成稳定的状态。同时SWNTs具有抗光漂白作用以及近红外波长的荧光特性。可在生命科学研究中作为荧光探针的载体。本文以SWNTs为载体,借助荧光染料SYBR Green Ⅰ （SG）特殊的荧光性质,对沙门氏菌属的两种血清型鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌进行快速检测,主要展开以下两个方面的工作：1.检测含trps基因的鼠伤寒沙门氏菌。本研究方法利用荧光的淬灭和恢复对含trps基因的鼠伤寒沙门氏菌进行检测,SWNTs对寡核苷酸（ssDNA）特异的结合作用和SG对核酸分子（包括ssDNA和dsDNA）特异的插入作用及极强灵敏性,建立一种快速检测含trpS基因的鼠伤寒沙门氏菌的方法。在本检测体系中,单独存在的SG分子是几乎不能产生荧光信号的。当加入探针分子（ssDNA）后,由于SG和探针DNA的插入作用能够检测到SG的荧光信号（520nm）。随后,SWNTs的加入,由于SWNTs选择性的与探针DNA的非共价作用使得探针DNA分子与S... 

【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 引言和文献综述
    1.1 沙门氏菌
        1.1.1 沙门氏菌的概述
        1.1.2 沙门氏菌的危害
        1.1.3 沙门氏菌的致病机制
    1.2 沙门氏菌的检测方法
        1.2.1 以核酸为基础的快速检测方法
        1.2.2 核酸技术结合荧光技术实现低浓度的核酸检测
    1.3 碳纳米管及其作用机制
    1.4 本文的研究内容
第二章 碳纳米管/SYBR GREEN Ⅰ探针检测鼠伤寒沙门氏菌的研究
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验材料与仪器
        2.2.2 实验溶液配制
        2.2.3 实验方法
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 SWNTs对荧光的淬灭
        2.3.2 目标DNA序列对荧光值的恢复
        2.3.3 检测体系工作原理的研究
        2.3.4 检测体系特异性的研究
        2.3.5 鼠伤寒沙门氏菌的高灵敏检测
        2.3.6 凝胶电泳验证实验
    2.4 小结
第三章 碳纳米管/SYBR GREEN Ⅰ探针检测肠炎沙门氏菌的研究
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验材料与仪器
        3.2.2 实验溶液配制
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 DNA探针与SWNTs的共价联接
        3.3.2 目标DNA序列对荧光值的恢复
        3.3.3 高灵敏的检测肠炎沙门氏菌的16SrRNA基因组
        3.3.4 高灵敏的检测肠炎沙门氏菌的16SrRNA
    3.4 小结
第四章 结论
参考文献
攻读硕士学位期间撰写、发表的学术论文
致谢
附录



本文编号：3534243