电针大肠下合穴上巨虚等对UC模型大鼠TNF-α及NF-κB的影响
本文关键词:电针大肠下合穴上巨虚等对UC模型大鼠TNF-α及NF-κB的影响,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的:对比观察电针溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠上巨虚、足三里、下巨虚、阳陵泉等穴后对血清肿瘤坏死因子-α (TNF-α)及结肠组织核因子-kB (NF-kB)、烟碱型乙酰胆碱受体α7(nAChRα7)表达的影响并探讨大肠下合穴上巨虚治疗大肠腑病的相对特异性。 方法:将70只SD大鼠随机分为空白、模型、上巨虚、足三里、下巨虚、阳陵泉及承筋共7组,每组10只,雌雄各半。空白组大鼠以生理盐水灌肠,余组均采用2-4-6三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇溶液灌肠诱导复制溃疡性结肠炎模型,模型组仅固定于鼠板不治疗,5个穴位组分别电针大鼠双侧相关穴位,电针参数为疏密波(10/50Hz),左正右负,强度1-3mA,以肢体出现震颤为度,留针30分钟,每天一次,连续治疗10天,取材,肉眼观察大鼠结肠溃疡及炎症并评分,HE染色后光镜下观察各组大鼠结肠组织形态学变化,并以双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清TNF-α含量,免疫组织化学方法检测结肠NF-KB的表达,蛋白免疫印迹法(Western Blot)法检测结肠组织中nAChRa7表达。 结果:1.各组大鼠结肠组织形态学改变:①通过肉眼观察大鼠结肠溃疡及炎症并评分,结果:与空白组比较,余组结肠溃疡及炎症评分明显偏高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);与模型组比较,上巨虚、足三里组溃疡评分明显偏低,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);与上巨虚组比较:下巨虚、阳陵泉、承筋组的溃疡评分均偏高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01),足三里组与之相较差异无统计学意义(P0.05);与足三里比较,除承筋组评分较高、差异有统计学意义(P0.05)外,下巨虚、阳陵泉组与之相较差异无统计学意义(P0.05)。②光镜下观察HE染色后各组大鼠结肠组织形态学变化:空白组结肠无明显病理改变;模型组大鼠结肠可见溃疡形成和炎症,承筋组结肠病理损伤严重,上巨虚、足三里、下巨虚、阳陵泉组大鼠结肠黏膜病理损伤减轻,其中上巨虚组减轻更为明显。 2.各组大鼠血清中TNF-a的表达,结果显示:与空白组比较,余组大鼠血清TNF-α含量明显偏高,差异有显著统计学意义(P0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠血清中TNF-α明显偏低,差异有显著统计学意义(P0.01);与上巨虚组比较:其余治疗组血清中的TNF-α含量偏高,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01);与足三里、下巨虚组比较,除承筋组血清中的TNF-α含量较高、差异有统计学意义(P0.05)外,阳陵泉组与上述二组相较差异无统计学意义(P0.05)。 3.各组大鼠结肠组织中NF-K:B的表达,结果显示:与空白组比较,余组大鼠结肠组织中NF-K:B表达明显偏高,差异有显著统计学意义(P0.01);与模型组比较,四个下合穴组NF-KB明显偏低,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);与上巨虚组比较:下巨虚、阳陵泉、承筋组结肠组织NF-KB表达偏高,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01),足三里组与之相较差异无统计学意义(P0.05);与足三里、下巨虚组比较,除承筋组结肠组织中的NF-κB表达较高、差异有统计学意义(P0.05或P0.01)外,阳陵泉组与上述二组相较差异无统计学意义(P0.05)。 4.各组大鼠结肠组织中nAChRa7的表达,结果显示:与空白组比较,除上巨虚组外余5组结肠组织中nAChR a7表达明显偏低,差异有显著统计学意义(P0.01);与模型组比较,4个下合穴组结肠组织nAChR a7表达明显偏高,差异有显著统计学意义(P0.01);与上巨虚组比较:下巨虚、阳陵泉、承筋组结肠组织nAChR a7表达均偏低,差异有显著统计学意义(P0.01),足三里组与之相较差异无统计学意义(P0.05);与足三里、下巨虚、阳陵泉组比较,承筋组结肠组织中的nAChR a7表达较低,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。 结论:1.电针消化系统的下合穴及承筋均能降低UC模型大鼠结肠黏膜溃疡及炎症评分、血清TNF-α含量和结肠NF-KB水平并增加结肠nAChR a7的表达,其机制可能是通过调节NF-κB信号通路相关因子,抑制免疫应答,调控炎症反应,改善结肠组织损伤来实现的。 2.比较而言:电针上巨虚治疗UC模型大鼠的效应优于下巨虚、阳陵泉和承筋,其部分效应优于足三里,说明上巨虚治疗UC存在一定的相对特异性。 3.本研究结果部分证实:“合治内府”指下合穴的临床意义主要在于治疗相对应的内腑病变,其具体机制仍需进一步研究。
【关键词】:电针 下合穴 UC模型大鼠 TNF-α NF-κB nAChRα7 合治内府
【学位授予单位】:湖南中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R245;R-332
【目录】:
- 中文摘要3-5
- Abstract5-8
- ~.略词表8-11
- 引言11-13
- 第一部分 材料和方法13-20
- 1. 实验材料13-15
- 1.1 实验动物13
- 1.2 实验仪器13-14
- 1.3 实验试剂14-15
- 2. 实验方法15-19
- 2.1 动物分组15
- 2.2 造模及评估方法15
- 2.3 穴位定位15-16
- 2.4 施治方法16
- 2.5 实验步骤16
- 2.6 标本取材及处理方法16-17
- 2.7 观察指标及检测方法17-19
- 3. 统计学处理方法19-20
- 第二部分 结果与分析20-27
- 1. 结肠溃疡及炎症组织肉眼图片及评分结果20-21
- 2. HE染色光镜下观察结肠组织形态学改变21-22
- 3. 血清TNF-α结果22-23
- 4. 结肠NF-κB结果及光镜观察结果23-26
- 5. 各组大鼠血清TNF-α与结肠NF-κB相关性分析26
- 6. 结肠nAChRα7结果26-27
- 第三部分 讨论27-39
- 1. “合治内府”理论的论述27-29
- 1.1 中医学关于“合治内府”理论的阐述27
- 1.2 “合治内府”理论在消化系统常见疾病中的临床应用27-29
- 2. 中医对溃疡性结肠炎的认识29-30
- 2.1 中医对溃疡性结肠炎病机的认识29
- 2.2 中医治疗溃疡性结肠炎的现状29-30
- 3. 现代医学对溃疡性结肠炎的认识30-31
- 3.1 溃疡性结肠炎的病因及发病机制30-31
- 3.2 现代医学对溃疡性结肠炎的治疗31
- 4. 针灸治疗溃疡性结肠炎的效应机制研究31-32
- 5. 本项目研究的目的与意义32-33
- 6. 动物模型的选择33-34
- 7. 电针对溃疡性结肠炎模型大鼠的疗效评价34-37
- 7.1 对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织形态的影响34-35
- 7.2 对溃疡性结肠炎大鼠血清TNF-α含量的影响35
- 7.3 对溃疡性结肠炎大鼠结肠NF-κB表达的影响35-36
- 7.4 大鼠血清TNF-α与结肠组织NF-κB相关性分析36
- 7.5 对溃疡性结肠炎大鼠结肠nAChRα7表达的影响36-37
- 8. 问题与展望37-39
- 第四部分 结论39-40
- 致谢40-41
- 参考文献41-46
- 附录A46-56
- 附录B56
【参考文献】
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本文编号:354244
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