HIV-1感染免疫保护机制的研究
发布时间：2022-01-11 16:15
目的:获得性免疫缺陷综合征又称之为艾滋病（AIDS）目前已夺走了全世界2500多万人的生命,已然成为危害人类生命的四大杀手之一。近年来,临床常规使用最多的是高效的抗逆转录病毒治疗（HAART）,但因其价格昂贵、病人难以承受而导致依从性差、副作用大等,并且不能完全清除病毒。HIV分为:HIV-1和HIV-2,目前主要流行的是HIV-1。所以,研发并设计出安全有效的抗艾滋病病毒1型（HIV-1）疫苗显得尤为迫切。研究发现,CD8+毒性T细胞（CTL）对于控制HIV-1的复制发挥着重要的作用,当今以CTL为基础研制针对HIV-1疫苗成为热点之一。因此,本文主要研究CTL的抗HIV-1病毒功能,以期能明确CTL的抗病毒作用机制;同时研究CTL、抗体和NK细胞抗病毒的相对贡献以及协同作用,为疫苗研发提供重要信息。我们将从4个方面对其抗病毒机制进行研究:第一,通过体外增殖试验研究影响人免疫缺陷病毒1型（HIV-1）特异性的CTL增殖反应的因素;第二,应用不同的抗原肽直接刺激HIV-1特异性CTL克隆细胞株以检测其抗病毒功能;第三,比较识别同一抗原表位的不同CTL克隆的抗病毒功...
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：95 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HIV-1基因组全长图
车 样承载着抗原肽。然后与 CFSE 荧光标记的 CD8+阴性对照组（不加抗原肽刺激）：在不添加抗原肽的条/L CFSE 荧光标记 5×106的细胞，同等条件下与其他各培上述步骤中细胞最后培养浓度均为 2×106/ml。计学处理 Graphpad Prism 5.0 软件进行统计学的处理，P < 0.05 被义的。结果MCs 的分离 Ficoll 液将单个核细胞从外周血中分离出来，离心后可观下图 3.1 所示：处于上层和中层之间的 层白色云雾细带细胞（PBMCs）。
HIV-1 感染免疫保护机制的研究3.4.2. 流式实验分析用流式细胞仪检测少量磁珠分离后的 CD8+T 细胞，以明确其分离浓度。首先从 PBMCs 中分离出 CD8+T 细胞（图 3.2 A），使用流式细胞术检测到纯度为97%。然后通过 HIV-1 Tetramer 染色从总的 CD8+T 细胞中分离出 HIV-1 特异性CD8+T 细胞（CTL），比例为 4.12%(图 3.2 B)，培养后第 7 天，3 个抗原肽刺激组的 CFSE 标记的 CTL 都得到了增殖活化。抗原肽直接刺激组（图 3.2 C）和抗原肽刺激 2 小时组（图 3.2 D）均有非常明显的 3 个分裂峰。而 APCs 呈递抗原肽刺激组（图 3.2 E）出现了 4 个明显的分裂峰，因为早在培养的第 4 天，APCs呈递抗原肽刺激组就已经开始出现增殖。说明初始 CTL 细胞在混合培养中都得到了增殖活化。
【参考文献】：
期刊论文
[1]艾滋病抗病毒治疗及药物研究进展[J]. 姚成,朱盼盼,谢东. 药学进展. 2018(02)
[2]青年学生艾滋病相关知识、态度与行为现状[J]. 陈盼盼,董艺蕾,宋爱红,肖绍坦,赵希畅. 健康教育与健康促进. 2017(06)
[3]195例艾滋病异性性传播方式流行病学分析[J]. 张秀新,薛芳辉,赵东设,陈艳艳. 中国农村卫生事业管理. 2016(08)
[4]建立学校艾滋病疫情通报制度的伦理问题研究[J]. 张璐平,韩跃红. 昆明理工大学学报(社会科学版). 2016(02)
[5]Recent advances in synthetic carbohydrate-based human immunodeficiency virus vaccines[J]. Zhenyuan Wang,Chunjun Qin,Jing Hu,Xiaoqiang Guo,Jian Yin. Virologica Sinica. 2016(02)
[6]全球艾滋病的流行现状及发展趋势[J]. 史灵梅,肖武. 旅行医学科学. 2008(04)
[7]艾滋病预防研究中的医学人类学述评[J]. 高一飞. 广西民族大学学报(哲学社会科学版). 2008(03)
[8]人群艾滋病防治知识调查[J]. 韩晓军,朱江,孙冬青,马瞧勤. 浙江预防医学. 2007(12)
[9]艾滋病的抗病毒治疗与我国的免费治疗现状[J]. 张福杰,文毅,于兰,马烨,潘捷,赵燕. 科技导报. 2005(07)
[10]HIV/AIDS的流行现况及研究进展[J]. 董建群,张孔来. 中国公共卫生. 2001(12)
硕士论文
[1]两类具有C-M发生率和免疫反应的HIV模型分析[D]. 彭霞.西南大学 2015
本文编号：3583077
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：95 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HIV-1基因组全长图
车 样承载着抗原肽。然后与 CFSE 荧光标记的 CD8+阴性对照组（不加抗原肽刺激）：在不添加抗原肽的条/L CFSE 荧光标记 5×106的细胞，同等条件下与其他各培上述步骤中细胞最后培养浓度均为 2×106/ml。计学处理 Graphpad Prism 5.0 软件进行统计学的处理，P < 0.05 被义的。结果MCs 的分离 Ficoll 液将单个核细胞从外周血中分离出来，离心后可观下图 3.1 所示：处于上层和中层之间的 层白色云雾细带细胞（PBMCs）。
HIV-1 感染免疫保护机制的研究3.4.2. 流式实验分析用流式细胞仪检测少量磁珠分离后的 CD8+T 细胞，以明确其分离浓度。首先从 PBMCs 中分离出 CD8+T 细胞（图 3.2 A），使用流式细胞术检测到纯度为97%。然后通过 HIV-1 Tetramer 染色从总的 CD8+T 细胞中分离出 HIV-1 特异性CD8+T 细胞（CTL），比例为 4.12%(图 3.2 B)，培养后第 7 天，3 个抗原肽刺激组的 CFSE 标记的 CTL 都得到了增殖活化。抗原肽直接刺激组（图 3.2 C）和抗原肽刺激 2 小时组（图 3.2 D）均有非常明显的 3 个分裂峰。而 APCs 呈递抗原肽刺激组（图 3.2 E）出现了 4 个明显的分裂峰，因为早在培养的第 4 天，APCs呈递抗原肽刺激组就已经开始出现增殖。说明初始 CTL 细胞在混合培养中都得到了增殖活化。
【参考文献】：
期刊论文
[1]艾滋病抗病毒治疗及药物研究进展[J]. 姚成,朱盼盼,谢东. 药学进展. 2018(02)
[2]青年学生艾滋病相关知识、态度与行为现状[J]. 陈盼盼,董艺蕾,宋爱红,肖绍坦,赵希畅. 健康教育与健康促进. 2017(06)
[3]195例艾滋病异性性传播方式流行病学分析[J]. 张秀新,薛芳辉,赵东设,陈艳艳. 中国农村卫生事业管理. 2016(08)
[4]建立学校艾滋病疫情通报制度的伦理问题研究[J]. 张璐平,韩跃红. 昆明理工大学学报(社会科学版). 2016(02)
[5]Recent advances in synthetic carbohydrate-based human immunodeficiency virus vaccines[J]. Zhenyuan Wang,Chunjun Qin,Jing Hu,Xiaoqiang Guo,Jian Yin. Virologica Sinica. 2016(02)
[6]全球艾滋病的流行现状及发展趋势[J]. 史灵梅,肖武. 旅行医学科学. 2008(04)
[7]艾滋病预防研究中的医学人类学述评[J]. 高一飞. 广西民族大学学报(哲学社会科学版). 2008(03)
[8]人群艾滋病防治知识调查[J]. 韩晓军,朱江,孙冬青,马瞧勤. 浙江预防医学. 2007(12)
[9]艾滋病的抗病毒治疗与我国的免费治疗现状[J]. 张福杰,文毅,于兰,马烨,潘捷,赵燕. 科技导报. 2005(07)
[10]HIV/AIDS的流行现况及研究进展[J]. 董建群,张孔来. 中国公共卫生. 2001(12)
硕士论文
[1]两类具有C-M发生率和免疫反应的HIV模型分析[D]. 彭霞.西南大学 2015
本文编号：3583077
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