肠道病毒D组68型溶瘤活性的初步探索及其新型中和实验方法建立

发布时间：2022-01-17 21:18

　　肿瘤是人类第二大非传染性疾病,2015年全球因为癌症死亡的人数超过880万。无论是在发达国家还是发展中国家,癌症发病率和死亡率逐年升高,已经成为一个非常重要的公共卫生问题。目前针对癌症的主要治疗手段仍然是围绕着手术切除、物理放疗和化学放疗进行开展,但疗效仍然不甚理想。近年来,随着基于人单纯疱疹病毒（HSV-1）的溶瘤病毒在黑色素肿瘤治疗上显示出良好效果,发展新型的溶瘤病毒疗法获得高度重视。肠道病毒是发展新型溶瘤病毒的重要对象,目前已有多种基于肠道病毒的新型溶瘤病毒药物正在开发之中。肠道病毒D组68型（EV-D68）是一种主要导致上呼吸道感染并且总体症状较为温和的肠道病毒,具有发展为溶瘤病毒的良好潜力。本研究开展了以EV-D68为基础发展新型溶瘤病毒的可行性研究,系统分析了 EV-D68对不同人类肿瘤细胞的杀伤效能,为发展新型溶瘤病毒疗法提供重要基础。本研究首先分析了 EV-D68对92种不同人肿瘤细胞的体外杀伤能力,结果显示,EV-D68对多种不同人肿瘤细胞均具有良好的体外杀伤效能,其中对肺癌、肝癌、前列腺癌、淋巴瘤和白血病细胞的杀伤效果较好,并且EV-D68对这几类癌症的溶瘤能力尚未... 

【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：92 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词(Abbreviation)
前言
    1 肿瘤流行病学
        1.1 性别分布
        1.2 地域分布
        1.3 年龄分布
    2 淋巴瘤和白血病的流行病学
    3 淋巴瘤和白血病的发病因素
        3.1 感染因素
        3.2 免疫因素
        3.3 物理化学因素
    4 淋巴瘤和白血病的治疗方式
        4.1 化学治疗
        4.2 放射治疗
        4.3 生物治疗
        4.4 造血干细胞移植
    5 溶瘤病毒
        5.1 溶瘤病毒发展历史
        5.2 溶瘤病毒的研究现状
        5.3 溶瘤病毒作用机制
        5.4 溶瘤病毒的体内分布
        5.5 人肠道病毒用作溶瘤病毒
    6 人肠道病毒的生物学特征
        6.1 人肠道病毒的分类学
        6.2 人肠道病毒基因组结构
        6.3 人肠道病毒颗粒结构与理化性质
        6.4 EV-D68流行病学、临床症状及其预防
        6.5 EV-D68研究现状及其血清学研究
    7 酶联免疫斑点法(ELISPOT)
    8 本研究的思路、目的与意义
材料与方法
    1 材料
        1.1 仪器
        1.2 试剂与材料
        1.3 常用溶液和试剂配置
    2 方法
        2.1 常规细胞生物学实验
        2.2 病毒培养与滴度测定
        2.3 病毒对肿瘤细胞的体外杀伤实验
        2.4 流式细胞技术
        2.5 蛋白免疫印迹实验
        2.6 小分子化学药物实验
        2.7 单克隆抗体的制备
        2.8 免疫荧光实验(IFA)
        2.9 酶联免疫斑点法(ELISPOT)中和实验方法
结果与分析
    1 EV-D68病毒的制备和评价
        1.1 EV-D68病毒的制备
        1.2 EV-D68病毒的评价
    2 EV-D68病毒对肿瘤细胞的溶瘤效果分析
        2.1 EV-D68病毒体外溶瘤效果的初步探索
        2.2 淋巴瘤白血病细胞表面EV-D68病毒受体表达分析
        2.3 EV-D68对淋巴瘤和白血病的体外溶瘤效果分析
        2.4 淋巴瘤白血病的体内成瘤与EV-D68的体内溶瘤分析
        2.5 EV-D68对淋巴瘤白血病杀伤的凋亡分析
    3 EV-D68新型病毒滴度和中和抗体检测方法的建立
        3.1 EV-D68单克隆抗体的性质鉴定
        3.2 EV-D68的ELISPOT方法的建立与优化
        3.3 ELISPOT方法与传统CPE方法的一致性比较
讨论
总结与展望
参考文献
在校期间内发表的论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]肠道病毒68型新型中和试验方法的建立及其初步应用[J]. 万俊凯,王玮,侯汪衡,李姝璇,赵欢,郑清炳,何水珍,程通,夏宁邵.  病毒学报. 2017(05)
[2]埃可病毒25型新型中和实验方法的建立与应用[J]. 李姝璇,杨立生,侯汪衡,赵欢,万俊凯,陈梦媛,何水珍,程通,夏宁邵.  生物技术通讯. 2016(01)
[3]门冬酰胺酶联合CHOP方案治疗结外NK/T细胞淋巴瘤的临床效果研究[J]. 张佃富,方瑞艳,马德亮.  中国实验血液学杂志. 2015(04)
[4]Helicobacter pylori infection in gastric mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma[J]. Jeong Bae Park,Ja Seol KooJeong.  World Journal of Gastroenterology. 2014(11)
[5]肠道病毒71型分子生物学研究进展[J]. 刘丽艳,朱启镕.  微生物与感染. 2010(01)

硕士论文
[1]肠道病毒71型（EV71）与柯萨奇病毒A组16型（CA16）单克隆抗体治疗的可行性评价[D]. 李志群.厦门大学 2014
[2]肠道病毒分离鉴定及EV71快速高通量中和实验方法的建立[D]. 蔡毅君.厦门大学 2009



本文编号：3595457