hAMSCs培养上清液对痤疮丙酸杆菌体外抑菌实验初步研究

发布时间：2022-01-25 20:15

　　目的:分离、培养及鉴定人羊膜间充质干细胞（Human amonionmesenchymal stem cells,h AMSCs）,收集其条件培养上清液（Conditioned medium of h AMSCs,h AMSCs-CS）;探讨h AMSCs-CS是否具有抑制痤疮丙酸杆菌生长的作用。方法:采用机械分离联合二酶消化法从人羊膜组织中分离、提取h AMSCs,利用流式细胞术及波形蛋白免疫组化对h AMSCs进行鉴定,收集各代h AMSCs-CS。将收集好的各代上清液常温解冻,使用涂抹法直接观察上清液是否具有抑制痤疮丙酸杆菌生长作用,进一步使用打孔法测量抑菌圈大小,根据药敏实验判断标准进行药敏结果判断,采用SPSS19.0软件进行统计分析。结果:hAMSCs呈典型的贴壁生长,细胞呈纤维状,长梭型,高表达CD90、CD105、CD73,几乎不表达CD34、CD11b、CD19、CD45和HLA-DR,波形蛋白表达阳性;抹药法显示原代—2代h AMSCs-CS组有细菌生长,但3—5代h AMSCs-CS抹药组无细菌生长。打孔法显示原代—2代h AMSCs-CS及生理盐水组无抑菌圈形成... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

人羊膜间充质干细胞生长形态学（×100）

图 1：人羊膜间充质干细胞生长形态学（×100）注：图 A 示原代 hAMSCs 形态，呈梭型、多角形、星形；图 B 示第 3 代 hAMSCs 态，呈单层放射状或漩涡状生长，以梭型为主。2.2 免疫细胞化学染色 hAMSCs 波形蛋白情况镜下观察到第 4 代 hAMSCs 经过波形蛋白 DAB 染色后变成浅红色，结果呈阳性而对照组没有发生显色反应（图 2）

流式细胞结果显示人羊膜间充质干细胞高表达CD90、CD105、CD73、CD44；几乎不表达CD34、CD11b、CD19、CD45及HLA-DR

【参考文献】：
期刊论文
[1]壳聚糖创伤敷料用于调Q激光术后创面修复的分析[J]. 陈静,桑忠强,沈帅帅,何勤国.  世界复合医学. 2017(02)
[2]痤疮患者痤疮丙酸杆菌对大环内酯类抗生素的敏感性分析[J]. 孙菲,凌勇活,李明,张霞,阮建波.  皮肤性病诊疗学杂志. 2016(04)
[3]人羊膜间充质干细胞培养上清液对人成纤维细胞生物学功能的影响[J]. 吴骐而,吕璐,辛海明,罗亮,童亚林,莫永亮,岳毅刚.  中华烧伤杂志. 2016 (06)
[4]痤疮丙酸杆菌抗生素耐药的研究进展[J]. 王奇飒,孙东杰.  皮肤病与性病. 2015(06)
[5]痤疮丙酸杆菌对米诺环素的敏感性研究[J]. 梅嬛,沈永年,吕桂霞,蔡晴,刘维达.  中国麻风皮肤病杂志. 2015(04)
[6]武汉地区痤疮患者皮损中分离的丙酸杆菌耐药性分析[J]. 曾宪玉,姜敏,付辰,吴卓璇,刘雯,董碧麟,曾志良,王玮蓁.  中国皮肤性病学杂志. 2014(02)
[7]人羊膜间充质干细胞的生物学特性及临床前研究[J]. 付蒙,张艳梅,王佃亮,曾虹燕,孙晋伟.  中国生物工程杂志. 2011(12)
[8]应用抗生素治疗痤疮可能并发上呼吸道感染[J]. Margolis D.J.,Bowe W.P.,Hoffstad O.,Berlin J.A.,潘敏.  世界核心医学期刊文摘(皮肤病学分册). 2006(04)
[9]美国临床实验室标准委员会推荐药敏试验操作方法和判断标准（2005年修订版）[J]. 马越,李景云,金少鸿.  中华医学杂志. 2005(17)



本文编号：3609141