结构域B在鼠冠状病毒S蛋白的抗原性及膜融合中的作用

发布时间：2023-02-20 17:32

　　棘突(spike, S)蛋白是冠状病毒表面必不可少的跨膜糖蛋白,在病毒进入宿主细胞时具有结合受体和诱导膜融合的双重作用。大部分冠状病毒S蛋白的受体结合域位于S1-CTD(即相对应的结构域B),而经典的乙型冠状病毒模型鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus, MHV)的受体mCEACAM1a与S1-NTD(即相对应的结构域A)结合,其结构域B的作用仍未完全清楚。本研究通过构建结构域B和S2膜融合元件的缺失突变体,并使其在鼠神经母细胞瘤细胞系Neuro-2a内成功表达,证实了结构域B对病毒S蛋白导致的细胞-细胞间膜融合是必需的。用不同方法处理的病毒颗粒作为抗原免疫小鼠,所获得的多克隆抗体进一步显示,结构域B不但是S蛋白的主要抗原决定簇,而且能诱导中和抗体明显抑制病毒感染和S蛋白介导的膜融合作用。此结果为阐述不同冠状病毒的致病性与感染性差异提供了新思路。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞和病毒
    1.2 细胞培养与病毒感染
    1.3 质粒构建与细胞转染
    1.4 病毒颗粒纯化与灭活
    1.5 小鼠抗体制备
    1.6 蛋白印迹试验
    1.7 病毒中和实验
    1.8 病毒噬斑实验
2 结果
    2.1 结构域B缺失使鼠冠状病毒S蛋白不能诱导细胞-细胞间膜融合
    2.2 不同灭活处理的鼠冠状病毒均诱导产生识别S蛋白结构域B的抗体
    2.3 结构域B为鼠冠状病毒S蛋白的优势抗原决定簇
    2.4 抗体对鼠冠状病毒复制的抑制和S蛋白诱导的细胞-细胞间膜融合
3 讨论



本文编号：3747011