锌离子载体抗单纯疱疹病毒机制研究及泛素—蛋白酶体通路与病毒复制的关系初步探讨

发布时间：2023-03-30 01:02

　　早年的研究发现,锌离子在体内和体外均表现出抗病毒活性。人们已经将锌离子添加至杀微生物剂(Microbicide)中,制成生殖道抗病毒外用制剂,用于预防病毒的性传播。但到目前为止,对于锌离子抗病毒机制的研究鲜有报道。在本文中,我们首先研究了两个锌离子载体(Zinc ionophore):二硫代氨基甲酸吡咯烷(Pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)和轻基吡啶硫酮(Pyrithione,PT)抗人单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus, HSV),结果发现锌离子载体可以通过抑制细胞的泛素-蛋白酶体系统(Ubiquitin-proteasome system, UPS)来抑制病毒的复制。先前的一系列研究证明,许多病毒会“绑架”宿主细胞的UPS,帮助自身完成生命周期。在本文中,我们将首先初步讨论UPS对于病毒复制的影响,继而研究UPS通路中的其他组成元素,如其他泛素样标签等对于病毒复制的影响。最后,我们着重关注了一个与蛋白酶体结合的去泛素化酶USP14在病毒感染中的作用,初步提出了其发挥功能的机制。本文主要研究结果如下:1.我们报道了 PDTC和PT可...

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【学位级别】：博士

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缩略语
中文摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1. 人类单纯疱疹病毒概述
        1.1 HSV的病毒颗粒和基因组
        1.2 病毒的复制
        1.3 病毒的转录和翻译
        1.4 基因组的复制
        1.5 病毒的组装和释放
    2. 抗HSV药物研发及应用
    3. Zn²⁺在抗病毒治疗中的应用
    4. 泛素-蛋白酶体系统及其与病毒的相互作用
        4.1 泛素-蛋白酶体系统(UPS)
        4.2 去泛素化酶(Deubiquitinating enzymes,DUBs)
        4.3 UPS与病毒感染
        4.4 HSV与泛素-蛋白酶体系统的相互作用研究进展
    5. 非折叠蛋白反应(Unfolded protein response,UPR)
        5.1 PERK信号通路
        5.2 IRE1信号通路
        5.3 ATF6信号通路
        5.4 UPR与病毒感染的关系
        5.5 UPR与泛素-蛋白酶体通路的联系
第二章 锌离子载体抗单纯疱疹病毒机制研究
    绪言
    1. 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
    2. PDTC抗病毒研究结果与分析
        2.1 PDTC抑制HSV晚期基因的表达和病毒的复制
        2.2 PDTC抗HSV的作用依赖于其分子中的二硫代氨基甲酸基团
        2.3 Zn²⁺是PDTC发挥抗病毒活性所必需的金属离子
        2.4 PDTC对于HSV极早期基因的表达的影响
        2.5 PDTC的抗病毒作用与其抗氧化活性以及MAPK通路无关
        2.6 PDTC的抗病毒作用与其介导的UPS调节异常以及对NF-κB活性的抑制有关
        2.7 PDTC介导Zn²⁺内流从而抑制26S蛋白酶体的活性
        2.8 PDTC处理在HSV感染过程中稳定核PML
    3. PT抗病毒研究结果与分析
        3.1 PT抑制HSV gD蛋白的表达及病毒的复制
        3.2 Zn²⁺是PT发挥抗病毒作用所必需
        3.3 PT对HSV-1极早期基因表达的影响
        3.4 PT通过抑制NF-κB的激活抑制病毒的复制
        3.5 PT通过介导Zn²⁺内流增加细胞内泛素化水平
        3.6 PT通过抑制蛋白酶体活性抑制病毒复制
        3.7 PT稳定细胞核内的PML并抑制HSV-2介导的PML降解
    4. 讨论
第三章 UPS与HSV复制的关系初步研究
    绪言
    1. 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
    2. 结果与分析
        2.1 泛素对于病毒感染的影响
        2.2 HSV病毒感染对蛋白酶体组分表达的影响
        2.3 ICP0和Ub以及26S蛋白酶体组分在细胞内共定位
        2.4 REGγ与病毒的复制无关
        2.5 SUMO和NEDD8在病毒感染中的作用
        2.6 E1连接酶和去泛素化酶在病毒复制中的作用
    3. 讨论
第四章 USP14通过IRE1-XBP1增强HSV的复制
    绪言
    1. 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
    2. 结果与分析
        2.1 USP14是HSV病毒复制所必需
        2.2 Rpn11和UCH37对于HSV病毒复制的影响
        2.3 USP14与ICP0共定位
        2.4 干扰USP14的表达不影响病毒介导的NF-κB的激活
        2.5 USP14对于病毒复制的影响与其去泛素化酶活性无关
        2.6 IRE1与病毒ICP0共定位
        2.7 HSV感染对于细胞UPR效应
        2.8 IRE1的活性和病毒感染的关系
        2.9 过表达XBP1或抑制ERAD可以促进病毒复制
    3. 讨论
参考文献
博士期间发表论文和申请专利
致谢



本文编号：3774861