蒲公英总黄酮对脑缺血模型的干预作用研究

发布时间：2017-05-20 03:14

  本文关键词：蒲公英总黄酮对脑缺血模型的干预作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：观察蒲公英总黄酮对小鼠软脑膜微循环、小、大鼠脑缺血再灌注模型的保护作用。通过研究大、中、小剂量蒲公英总黄酮混悬液对小鼠脑部血流量的改变,小、大鼠脑缺血再灌注模型组织匀浆中ATP酶,一氧化氮合酶(NOS),乳酸脱氢酶含量(LDH),超氧化物歧化酶(SOD)的活力,乳酸(LD),一氧化氮(NO),丙二醛(MDA),白细胞介素-1β(IL-1β),血管细胞粘附因子(VCAM-1),细胞间粘附分子1(ICAM-1),以及血清中神经元烯醇化酶(NSE), S100β蛋白(S-100β),髓过氧化物酶(MPO)含量及脑组织海马和皮质病理改变,从而探讨蒲公英总黄酮对小鼠血流平均灌注量,小鼠脑部血流变化,小、大鼠缺血再灌注损伤的保护作用。方法：采用结扎双侧颈总动脉造小鼠脑膜微循环障碍模型。术前,给予各对应组小鼠尼莫地平、脑络通、大、中、小剂量的蒲公英总黄酮混悬液灌服,空白组、模型组只灌服同体积羧甲基纤维素钠(0.5%CMC),空白组做假手术组处理,1次1d,连服7d。末次灌服后1h(禁食12h)开始试验。取截扎前1分50秒--2分钟的血流灌注量平均值作为截扎前的血流平均灌注量,取3分50秒--4分钟的血流灌注量平均值作为截扎后的血流平均灌注量,用结扎后的血流平均灌注量减去结扎前的血流平均灌注量再除以结扎前的血流平均灌注量,从而计算出造模小鼠的脑血流下降率。采用结扎双侧颈总动脉缺血10min,再灌10min,再缺血10min的方法,造反复脑缺血小鼠再灌注模型。术前,给予各对应组小鼠尼莫地平、脑络通、大、中、小剂量的蒲公英总黄酮混悬液灌服,空白组、模型组只灌服同体积羧甲基纤维素钠(0.5%CMC),1次1d,连服7d。末次给药1h后造模,手术后24h,摘眼球取血,半个小时后离心,取上清液测NSE、S-100β的含量,取脑组织测定小鼠ATP酶、SOD、LDH的活性及MDA、LD和蛋白的含量,光镜观察脑组织形态学变化和死亡率。采用线栓法阻塞左侧大脑中动脉,建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。术前,给予各对应组小鼠尼莫地平、脑络通、大、中、小剂量的蒲公英总黄酮混悬液灌服,空白组、模型组只灌服同体积羧甲基纤维素钠(0.5%CMC),1次1d,连服7d。于末次给药1h后造模。术后等动物清醒,评估其神经功能缺失,再灌注22h后,测定组织中ATP酶的活力,NO、NOS、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1、TNF-α的含量以及血清中NSE、MPO的含量,光镜观察脑组织形态学变化和死亡率。结果：小鼠脑部微循环障碍模型、小鼠反复脑缺血再灌注模型、大鼠局灶性脑缺血灌注模型均复制成功。蒲公英总黄酮各用药组均显著改善小鼠结扎后血流平均灌注量和脑血流下降幅度(P0.01),从而促进小鼠侧枝循环和局部血液循环,进而改善小鼠脑部微循环障碍；可使大、小鼠死亡率及大鼠神经功能缺失评分显著降低(P0.01)。大剂量蒲公英总黄酮组可使小、大鼠血清中NSE、S-100β及MPO水平显著降低(P0.01),中剂量蒲公英总黄酮组可使大、小鼠血清中NSE、S-100β明显降低(P0.05),小剂量蒲公英总黄酮组具有降低大、小鼠血清中NSE、S-100β的趋势(P0.05),可使大鼠血清中MPO水平明显降低(P0.05),中小剂量蒲公英总黄酮组可使小鼠血清中NSE水平显著降低(P0.01)；大、中、小剂量蒲公英总黄酮组可使大小鼠脑组织中MDA、IL-1β、 ICAM-1、TNF-α、NOS的活力、LD和LDH的活性显著降低(P0.01)；大、中剂量蒲公英总黄酮组可使小鼠脑组织中SOD的活力及小大鼠脑组织中ATP酶水平显著升高(P0.01)；小剂量蒲公英总黄酮组可使小鼠脑组织中Mg++-ATP酶、Ca++-ATP酶活力显著升高(P0.01),Na+K+ATP酶的活力明显升高(P0.05),大鼠脑组织中Na+K+-ATP酶、Mg++-ATP酶的活力显著升高(P0.01),Ca++-ATP酶活力明显升高(P0.05)；大剂量蒲公英总黄酮组可使大鼠脑组织中NO、VCAM-1水平显著降低(P0.01),中剂量蒲公英总黄酮组可使大鼠脑组织中NO水平显著降低(P0.01),VCAM-1水平明显降低(P0.05),小剂量蒲公英总黄酮组可使大鼠脑组织中VCAM-1及NO水平明显降低(P0.05)；显著保护脑组织中海马、皮质区免受缺血再灌注引起的脑损伤(P0.01)。结论：蒲公英总黄酮可改善造模后小鼠侧支循环和局部血液循环,进而升高小鼠结扎后的血流平均灌注量,使脑血流下降降低,从而改善小鼠脑膜微循环障碍；提高脑组织LDH、SOD及ATP酶的活力,改善脑部能量供应障碍,减轻脑组织损伤；降低脑组织中LD、NOS活力和NO水平、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1、 TNF-α的含量及MDA水平、血清中NSE、MPO、S-100β蛋白的含量；降低死亡率；改善神经功能缺失评分；保护大脑皮质及海马区免受缺血再灌注引起的脑损伤。
【关键词】：蒲公英总黄酮 脑膜微循环 缺血再灌注损伤 动物模型
【学位授予单位】：河南中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 英文缩写字中英文全称对照表4-7
• 摘要7-9
• Abstract9-12
• 前言12-14
• 实验一 蒲公英总黄酮对小鼠脑膜微循环的影响14-18
• 1 实验材料14-15
• 1.1 实验药物14
• 1.2 实验试剂14
• 1.3 仪器14
• 1.4 实验动物14-15
• 2 实验方法15-16
• 2.1 造模与给药15
• 2.2 检测指标15-16
• 3 统计学处理方法16
• 4 实验结果16-17
• 5 小结17-18
• 实验二 蒲公英总黄酮对小鼠反复脑缺血再灌注模型的影响18-32
• 1 实验材料18-19
• 1.1 实验药物18
• 1.2 实验试剂18
• 1.3 仪器18-19
• 1.4 实验动物19
• 2 实验方法19-24
• 2.1 造模与给药19
• 2.2 检测指标及测定方法19-24
• 3 统计学处理方法24
• 4 实验结果24-31
• 5 小结31-32
• 实验三 蒲公英总黄酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的影响32-46
• 1 实验材料32-33
• 1.1 实验药物32
• 1.2 实验试剂32
• 1.3 仪器32-33
• 1.4 实验动物33
• 2 实验方法33-35
• 2.1 造模与给药33
• 2.2 检测指标和测定方法33-35
• 3 统方计学处理法35
• 4 实验结果35-45
• 5 小结45-46
• 讨论46-55
• 1 对脑缺血疾病的认识46-48
• 1.1 中医对脑缺血疾病的认识46
• 1.2 中医对脑缺血病因病机的探讨46-47
• 1.3 中医脑缺血的治疗方法探讨47
• 1.4 现代医学对脑缺血的认识47
• 1.5 现代医学对脑缺血的病因病机探讨47-48
• 1.6 现代医学对脑缺血的治疗48
• 2 实验测试指标48-51
• 2.1 脑血流下降率48-49
• 2.2 炎症因子49-50
• 2.3 自由基50
• 2.4 能量代谢50
• 2.5 病理组织形态学50-51
• 2.6 神经行为学指标、死亡率51
• 3 蒲公英与脑缺血关系51
• 4 实验结果的讨论51-55
• 4.1 实验动物死亡原因分析52
• 4.2 对行为学的影响52
• 4.3 对炎症介质及炎症因子的影响52-53
• 4.4 脑组织中LD、LDH、ATP酶活力的影响53
• 4.5 对脑缺血再灌注小鼠脑组织中SOD、MDA含量的影响53-54
• 4.6 对病理组织形态学的影响54-55
• 结论55
• 参考文献55-59
• 致谢59-60
• 附录60-70
• 附录1 病理照片60-66
• 附录2 文献综述66-70
• 参考文献69-70

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 陈景耀,吴国荣,王习达,刘华,王建安,沈奇;蒲公英黄酮类物质的抗氧化活性[J];南京师大学报(自然科学版);2005年01期

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本文编号：380559