人肠道来源艰难梭菌感染Caco-2细胞对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响

发布时间：2023-10-06 14:13

　　目的:研究人肠道来源艰难梭感染Caco-2细胞对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。方法:用艰难梭菌毒素A和毒素B感染Caco-2细胞24 h,以未感染艰难梭菌毒素A和毒素B的Caco-2细胞为对照组,蛋白质免疫印迹法检测真核细胞核因子(NF-κB)通路蛋白P-p65和p65的表达; Caco-2细胞用6孔板制作爬片,待细胞长满6孔板后,以感染复数(MOI)=100加入艰难梭菌,与Caco-2细胞共培养3、6、9、12及24 h,革兰染色后油镜观察,记录黏附细菌数与细胞数,计算共培养时间与细菌黏附数量之间的关系;艰难梭菌感染Caco-2细胞12 h,以Caco-2为对照组,蛋白质免疫印迹法检测NF-κB通路蛋白P-p65、p65、IKKα及IκBα的表达。结果:艰难梭菌与Caco-2细胞共培养12 h时黏附数最多,P-p65和IKKα蛋白表达增加(P<0.05),p65和IκBα蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:人源艰难梭菌感染Caco-2细胞可激活NF-κB信号通路。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂与仪器
    1.2 方法
        1.2.1 细菌培养
        1.2.2 细胞培养
        1.2.3 显微镜观察艰难梭菌与细胞黏附
        1.2.4 Western blot 实验
2 结果
    2.1 艰难梭菌与Caco-2黏附
    2.2 毒素A和B感染Caco-2细胞后NF-κB信号通路p65蛋白表达
    2.3 艰难梭菌感染Caco-2细胞后NF-κB通路P-p65、p65总蛋白、IKKα及IκBα 蛋白表达
3 讨论



本文编号：3851859