人源轮状病毒VP4截短蛋白的原核表达及其与轮状病毒候选基因工程疫苗P2-VP8的比较研究

发布时间：2024-02-03 11:28

　　A组轮状病毒(RV)是引起婴幼儿严重腹泻的主要病原体,严重时导致死亡,疫苗接种是预防轮状病毒感染的有效手段。随着卫生条件的改善以及轮状病毒疫苗的推广,轮状病毒导致的发病率和死亡率均显著降低。但是,目前上市的疫苗均为减毒活疫苗,在轮状病毒导致的死亡率较高的欠发达地区的保护率低于50%,因此,急需发展更加安全有效的轮状病毒疫苗以降低轮状病毒感染导致的死亡率。高滴度的母源抗体是导致轮状病毒疫苗在这些地区保护率降低的主要原因之一。非复制型疫苗,特别是基因工程疫苗,由于安全性高,且通过肠道外免疫可以在一定程度上避免母源抗体的干扰,成为近年来研究的重点。本课题组在前期研究中基于大肠杆菌系统表达了截短羊轮状病毒的VP4*(aa26-476)蛋白,并通过小鼠模型证实该蛋白具有较好的免疫原性和免疫保护性。在前期工作的基础上,我们进一步表达了在婴幼儿中流行最为广泛的P[8]型轮状病毒Wa毒株的VP4*蛋白,并与目前已经进入临床Ⅰ、Ⅱ期的轮状病毒候选基因工程疫苗P2-VP8进行平行比较,研究其成为轮状病毒候选疫苗的可行性。结果发现:重组表达的VP4*和P2-VP8均具有较好的均一性和热稳定性;VP4*蛋白相...

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【部分图文】：

图２轮状病毒基因组ＰＡＧＥ电泳图及其编码蛋白［９］??Ｆｉｇ．２?Ｔｈｅ?ｇｅｎｏｍｅ?ａｎｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｏｆ?ｒｏｔａｖｉｒｕｓ［９］??

可以对轮状病毒ＲＮＡ进行分离检测。绝大多数情况下，最上面４条为ＶＰ１－ＶＰ４，??中间两条，分别为ＮＳＰ１和ＶＰ６，然后ＮＳＰ２、ＮＳＰ３、ＶＰ７三条跑在一起，无法??明显分开，最下面两条分别是ＮＳＰ４和ＮＳＰ５?（图２）?Ｍ。??ＲＮＡ?Ｐｒｏｔｅｉｎ??Ｓｅｇｍｅｎｔ??１?....

图３?ＶＰ４蛋白结构及其主要中和表位分布??２１，２３２４

的ＶＰ５?（图２），并增强轮状病毒的感染性［２ＱＩ。与ＶＰ７—样，ＶＰ４也是轮状病毒??的主要中和抗原，可刺激机体产生中和抗体Ｐ１］。ＶＰ５和ＶＰ８均含有中和抗体表??位（图３）在ＶＰ８上的５个线性Ｂ细胞表位中，有３个都是中和表位，其刺激??３??

图５全球轮状病毒流行情况ｍ??．１３７１??

状病毒感染情况调查，结果显示轮状病毒感染导致的比列约为２５％－４７％［３＼几??乎所有的儿童均感染过至少一次轮状病毒，其中２０％需要就诊（２５００万），每??年约２００万病例需要住院治疗，死亡病例也高达４４万［３７］（图５）其人数占总死??亡人数的５％［３８，３９］。随着卫生条件....

图７常见的轮状病毒基因型的分布情况［４３］??Ｆｉｇ．７?Ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌ?ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ?ｏｆ?ＲＶＡ?ｓｔｒａｉｎｓ［４３］??

型与混合感染达２８％，远超过全球分布的１８％。在能够分型的病毒中，Ｇ８型及??Ｐ［６］型毒株在非洲地区的流行率也显著高于其他地区，Ｐ［６］基因型可占到全部Ｐ??基因型的的２５％左右％?（图７）。??Ｅｕｒｏｐｅａｎ?Ｒｅｇｉｏｎ??Ｏｔｈｅ？??ＯｌＷＨｌ＊??黨▼參．％??图７....

本文编号：3894105