鲍曼不动杆菌荚膜通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路促进鼠巨噬细胞自噬和凋亡

发布时间：2024-03-07 02:43

　　目的:探讨不同厚度荚膜的鲍曼不动杆菌诱导鼠Raw 264. 7巨噬细胞自噬和凋亡的能力及潜在的机制。方法:从肺炎患者痰液中分离鉴定鲍曼不动杆菌,以刚果红染色法染色细菌荚膜并筛选荚膜厚度显著不同的菌株用于后续研究。分别以厚荚膜株(Ab-H株)和薄荚膜株(Ab-B株)感染Raw 264. 7细胞,于感染后1 h、3 h和6 h时收集细胞,采用免疫印迹法检测细胞自噬相关蛋白LC-3和Beclin-1表达,以及PI3K、Akt和mTOR磷酸化水平,采用流式细胞术检测细胞活性氧生成量和凋亡率。结果:鲍曼不动杆菌经刚果红染色后,菌体染成紫黑色,背景染成红色,荚膜不着色,可以清晰地观察到细菌荚膜厚度。筛选出两株荚膜厚度差异显著的鲍曼不动杆菌,分别为AbH株和Ab-B株。上述菌株感染Raw 264. 7细胞后均可以诱导细胞自噬和凋亡,并增加细胞活性氧生成量,PI3K、Akt和mTOR的磷酸化水平受到显著抑制,且抑制作用随着时间延长而增加(P <0. 05)。Ab-H株细胞凋亡率、自噬相关蛋白Becline-1表达量和活性氧生成量显著高于Ab-B株(P <0. 05)。结论:鲍曼不动杆菌能够...

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【部分图文】：

图5各组Raw264.7细胞PI3K、Akt和mTOR蛋白磷酸化水平检测

图4各组Raw264.7细胞活性氧生成量比较(DCFH-DA荧光探针法)3讨论

图4各组Raw264.7细胞活性氧生成量比较(DCFH-DA荧光探针法)

两株不同荚膜厚度鲍曼不动杆菌感染Raw264.7细胞后，细胞PI3K、Akt和mTOR的磷酸化水平显著受到抑制，且抑制作用随着时间延长而增强(P<0.05)。以Ab-H株作用Raw264.7细胞1h和3h时，细胞PI3K磷酸化水平显著低于Ab-B株作用(1h,t=3.2....

图3各组Raw264.7细胞凋亡率比较(AnnexinV-FITC/PI法)

图2各组Raw264.7细胞自噬相关蛋白LC3和Beclin-1表达比较2.3不同荚膜厚度鲍曼不动杆菌诱导Raw264.7细胞活性氧生成增加

图2各组Raw264.7细胞自噬相关蛋白LC3和Beclin-1表达比较

Ab-H株和Ab-B株均可诱导Raw264.7细胞不同程度的自噬和凋亡(图2和图3)。Raw264.7细胞自噬相关蛋白LC-3Ⅱ在感染后1h时未被检出，但随感染时间延长其表达量在各组细胞均增加。感染后3h和6h时，Ab-B组和Ab-H组细胞LC-3Ⅱ表达量显著高于对照组....

本文编号：3921267