埃博拉病毒重组膜蛋白Gp-Fc表达及免疫原性研究

发布时间：2017-05-26 20:08

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【摘要】：本研究利用HEK293F细胞表达了埃博拉病毒重组膜蛋白,并通过免疫小鼠初步研究了其免疫原性。按照人密码子使用频度优化编码埃博拉病毒膜蛋白胞外区基因,合成后将其插入到真核表达载体pXG-Fc中,构建埃博拉病毒糖蛋白和人IgG Fc片段融合蛋白表达质粒pXG-modGP-Fc。利用瞬时转染技术,将融合蛋白表达质粒转染到高密度培养的悬浮HEK293F细胞中,实现了分泌表达。通过Protein A亲和层析,得到了纯化的重组蛋白。将纯化的融合蛋白免疫小鼠,并通过间接ELISA对小鼠抗体效价进行评价。蛋白纯化及分析结果表明,本研究构建的真核表达系统能够有效表达埃博拉重组蛋白GP-Fc,细胞培养上清中重组蛋白以二聚体形式存在。通过间接ELISA分析,纯化的重组蛋白免疫实验动物后,可以在血清中检出高滴度的抗原特异性IgG,显示该重组蛋白具有良好的免疫原性。通过该研究,我们得到了具有良好免疫原性的重组蛋白,同时,该工作为研制基于重组蛋白的埃博拉疫苗以及筛选单克隆抗体打下基础。
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒和病毒病重点实验室;北京工业大学生命科学与生物工程学院;
【关键词】： 埃博拉病毒 疫苗 糖蛋白 免疫原性
【基金】：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治项目:重大传染病应急处置检测技术平台(2013ZX1004-101);埃博拉出血热防控应急研究(1061400100275)
【分类号】：R392
【正文快照】： 埃博拉病毒(Ebola Virus,EBOV)于1976年在苏丹和刚果共和国被首次发现后,在非洲多次暴发小规模疫情,但是因为每次传播范围小,时间短,没有造成大量人员感染和死亡,没有引起足够重视。2014年始于西非的埃博拉疫情[1],是埃博拉病毒被发现以来最为严重的一次,据WHO统计,目前已经超

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