重组腺病毒介导的绿色荧光蛋白转染对兔脂肪干细胞生长增殖及成脂分化的影响

发布时间：2017-05-28 00:09

  本文关键词：重组腺病毒介导的绿色荧光蛋白转染对兔脂肪干细胞生长增殖及成脂分化的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探讨携带绿色荧光蛋白的腺病毒载体(Ad-GFP)转染兔脂肪干细胞(rADSCs)后对其生长增殖及成脂分化的影响。方法:取新西兰大白兔(1.5~2.0kg、8~12周龄)腹股沟皮下脂肪垫3mL,采用贴壁法体外分离培养rADSCs。取第3代rADSCs细胞分为Ad-GFP转染组(A组)和未转染的对照组(B组),流式细胞术检测Ad-GFP转染rADSCs的效率。比色法检测两组细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,四氮唑复合物(XTT)比色法检测rADSCs的增殖情况。细胞成脂分化14d后行油红O染色,检测脂肪细胞分化率及细胞内脂滴含量。结果:两组rADSCs表面标志物CD29、CD44、CD90、CD105阳性表达率均在95%以上。不同MOI值rADSCs转染效率不同,当MOI值为10、30、50、100时转染效率分别为11.2%、42.7%、95.3%、97.1%。Ad-GFP转染后的rASCs贴壁后呈梭形,细胞质丰富,保持了良好的正常形态。两组rASCs培养上清液中LDH含量及rADSCs增殖情况比较,差异均无统计学意义(均P0.05)。两组细胞分化率和细胞内脂滴含量比较,差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:Ad-GFP转染rADSCs后,GFP可在细胞内稳定表达,对细胞无明显毒性作用,不影响rADSCs的生长、增殖及成脂化能力,是一种理想的脂肪干细胞示踪标记方法。
【作者单位】： 广西医科大学第五附属医院肝胆腺体外科;广西医科大学第五附属医院检验医学中心;广西医科大学第五附属医院整形美容外科;
【关键词】： 脂肪干细胞 重组腺病毒绿色荧光蛋白 细胞标记 细胞增殖 细胞分化
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81560316,81560358) 广西科学研究与技术开发计划资助项目(桂科攻1598012-1) 南宁市科学研究与技术开发计划资助项目(No.20153089,zc20153002)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是在脂肪组织的血管基质片段(SVF)中发现的一类间充质干细胞,具有较强的传代增殖能力和免疫耐受性等特点,它源于中胚层,来源丰富且易于分离,具有多向分化(成脂、成骨、成软骨等)能力以及旁分泌、免疫调节等功能,适用于多种治疗用

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本文编号：401490