胚胎小鼠肠神经胶质细胞的分离与鉴定

发布时间：2025-03-20 06:14

　　 目的:建立一种简便的分离与鉴定胚胎小鼠肠神经胶质细胞的方法。方法:分离14～16 d胚胎小鼠肠道组织,制备单细胞悬液,用神经胶质细胞生长专用的培养基进行培养,在倒置显微镜下观察胶质细胞的生长情况。在细胞贴壁达90%以上时进行纯化并传代,待细胞贴壁后使用GFAP、S100b和Sox10蛋白抗体作为胶质细胞的特异性标记物用免疫荧光法进行EGCs纯度的鉴定。结果:培养24 h部分细胞贴壁,随培养天数延长贴壁细胞的数量逐渐增多,胞体较前饱满,突起进一步向外延展。12～14 d时细胞贴壁达90%以上,传代后细胞状态良好。免疫荧光染色可见其GFAP、S100b和Sox10蛋白质染色阳性率均达90%以上,鉴定为肠神经胶质细胞。结论:我们建立了一种简便的分离与鉴定胚胎小鼠肠神经胶质细胞的方法,今后可以用于EGCs自身功能及与其他肠道细胞相互作用的研究。

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【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
        1.1 主要试剂及仪器
        1.2 动物
    2 方法
        2.1 玻片的包被
        2.2 胚胎小鼠肠道细胞分离
        2.3 EGCs的接种与培养
        2.4 EGCs的纯化
        2.5 EGC的形态观察与鉴定
            2.5.1 形态观察
            2.5.2 鉴定
        2.6 细胞免疫荧光染色法
结果
    1 EGCs形态随时间的变化
    2胚胎小鼠肠神经胶质细胞纯度鉴定
讨论



本文编号：4037511