LIF和bFGF对脐带间充质干细胞体外自我维持和更新的影响
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【摘要】:目的:研究LIF联合bFGF对人脐带间充质干细胞hUC-MSC增殖、干性维持及衰老的影响。方法:实验分为4组:对照组加入完全培养基(含10%FBS的α-MEM)常规培养;LIF组,加入含10 ng/ml LIF的完全培养液;bFGF组,加入含10 ng/ml bFGF的完全培养液;联合组,加入含10 ng/ml LIF和10 ng/ml bFGF的完全培养液。采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)测定各组第4代hUC-MSC生长曲线;在倒置相差显微镜下观察各组hUC-MSC形态变化;β-半乳糖苷酶染色检测各组细胞衰老情况;RT-PCR检测表达情况。结果:4组细胞生长曲线均近似S形,细胞增殖速率表现为联合组bFGF组LIF组对照组。对照组细胞较早出现衰老,增殖减慢;LIF组细胞早期形态维持较好,但增殖相对缓慢,后期大部分细胞衰老;bFGF组部分细胞呈衰老改变,但增殖较快;联合组细胞增殖迅速,能长期维持hUC-MSC形态特征,仅有少量衰老细胞。RT-PC R显示,LIF和bFGF均能上调PCNA、OCT4、NANOG,下调P16、P21、P53的表达,其联合作用效果更明显。结论LIF联合bFGF不仅可以促进hUC-MSC增殖,维持其干性而且能够延缓hUC-MSC的衰老。
【作者单位】: 南昌大学研究生院医学部;南昌大学第二附属医院骨科;九江学院基础医学院;
【关键词】: h UC-MSC LIF b FGF 自我更新 自我维持
【基金】:国家自然科学基金资助项目(81160226)
【分类号】:R329.28
【正文快照】: 人脐带间充质干细胞(human umbilical cordmesenchymal stem cells,h UC-MSC)是一类来源于脐带组织,具有自我更新和多向分化潜能的干细胞。h UC-MSC与其他来源的间充质干细胞具有相似的分化潜能、免疫表型与塑料贴壁性,比骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal st
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