小鼠主动脉环血管新生实验模型的优化

发布时间：2017-06-04 21:03

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【摘要】：目的:建立优化体外培养小鼠主动脉环血管新生实验模型的条件和方法。方法:分离C57BL/6小鼠的胸主动脉,剔除主动脉周围的脂肪及结缔组织,使用Ⅱ型胶原酶消化动脉,剥离血管外膜,将血管剪成0.5 mm长的动脉环,置于预先包被有鼠尾Ⅰ型胶原的96孔板中培养,给予DMEM+2.5%胎牛血清,DMEM+10%胎牛血清或DMEM+2.5%胎牛血清+血管内皮生长因子(VEGF,终浓度为50 ng/m L)100μL/孔,覆盖胶原表面。倒置显微镜下观察动脉环新生微血管。免疫荧光染色鉴定内皮细胞。结果:鼠尾Ⅰ型胶原包被的96孔板(DMEM+2.5%胎牛血清)内新生微血管数量明显多于24孔板(t=-6.000,P0.05)。DMEM+10%胎牛血清组新生微血管数量明显高于DMEM+2.5%胎牛血清组和DMEM+2.5%胎牛血清+VEGF组。DMEM+10%胎牛血清组培养2~4 d后小鼠主动脉环开始出芽,6~8 d后动脉环新生微血管分支、数量及长度达到高峰。结论:优化后的方法可以得到生长状态良好,出芽率高,纯度高的离体小鼠动脉环血管新生实验模型。
【作者单位】： 江苏大学附属医院心内科;
【关键词】： 主动脉环 血管新生 组织培养
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81170279,81370409) 江苏省科教兴卫工程项目(LJ201116) 江苏省六大人才高峰项目(WS074) 江苏省333高层次人才项目(BRA2014162)
【分类号】：R54;R-332
【正文快照】： 血管新生指在原有血管处通过芽生或非芽生的方式形成新生血管,涉及多种细胞类型及信号通路。建立近似生物体内环境的新生血管模型对了解血管新生相关的生理或病理性过程至关重要。1990年Nicosia等[1]首次将大鼠主动脉环模型应用于血管新生研究中,目前大鼠主动脉环模型广泛应用

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本文编号：422104