采用活体成像技术快速评价DNA疫苗载体在小鼠体内的表达
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【摘要】：目的采用活体成像技术快速评价DNA疫苗载体在小鼠体内的表达,为DNA疫苗载体的应用和改造提供参考。方法分别构建含有萤火虫荧光素酶基因(luciferase)及HIV-1CN54Gag基因DNA,且携带不同转录调控元件(posttranscriptional regulatory element)HPRE/WPRE的疫苗载体(p DRVI1.0Luc、p DRVI1.0HLuc、p DRVI1.0WLuc、p DRVI1.0Gag、p DRVI1.0HGag和p DRVI1.0WGag),均经后肢胫骨前肌注射BALB/c小鼠,20μg/只。p DRVI-1.0Luc、p DRVI1.0HLuc和p DRVI1.0WLuc组仅免疫1次,于免疫后第1、7、14天采用活体成像技术检测小鼠体内荧光表达强度;p DRVI1.0Gag、p DRVI1.0HGag和p DRVI1.0WGag组分别于第0、2、4周进行免疫,于末次免疫后第2周进行体液(ELISA法)及细胞免疫检测(ELISPOT法)。结果 p DRVI1.0Luc、p DRVI1.0HLuc、p DRVI1.0WLuc组小鼠于免疫后第1及7天,体内荧光均局限分布于注射部位,未出现扩散转移的现象,且p DRVI1.0HLuc质粒发光强度最强(P0.05),免疫第14天各组均未检测到明显的荧光素酶表达;p DRVI1.0HGag组小鼠血清中抗Gag蛋白特异性抗体水平和Gag蛋白特异的分泌IFNγ的脾淋巴细胞数均明显高于p DRVI1.0Gag和p DRVI1.0WGag组(P0.05)。结论活体成像技术可用于快速评价DNA疫苗载体在小鼠体内的表达,为DNA疫苗载体改造及免疫策略的优化提供了一个良好的研究平台。
【作者单位】： 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省虫媒传染病防控研究重点实验室;中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心;中国科学研究院合肥物质科学研究院医学物理与技术中心;
【关键词】： 活体成像 DNA疫苗
【基金】：中国医学科学院医学生物学研究所科技计划项目(IMB2013ZD01)
【分类号】：R392
【正文快照】： DNA疫苗是一种新型疫苗,被称为第三代疫苗。与传统的减毒活疫苗、灭活疫苗及蛋白亚单位疫苗比较,DNA疫苗具有安全性好、技术通用性好、可反复多次免疫、免疫反应更集中等优势[1]。DNA疫苗的免疫效果是由载体骨架及元件、靶抗原及佐剂、免疫方式、免疫方案等因素及其相互作用决
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