生物钟基因Clock对小鼠诱导性多能干细胞分化的影响

发布时间：2017-06-20 18:08

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【摘要】：目的研究生物钟基因Clock对小鼠诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)非定向分化的作用。方法将Teto-FUW-OSKM、M2rtTA、PsPAX2和PMD2.G4种质粒共转染293FT细胞,收集病毒上清,转染小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryo fibroblast,MEF)获得小鼠iPSC,并通过检测多能性基因表达及其体外分化能力对小鼠iPSC进行鉴定;通过RT-PCR检测小鼠iPSC在非定向分化和拟胚体形成过程中生物钟基因的表达,以及生物钟基因Clock下调后,与野生型细胞相比小鼠iPSC多能性基因的表达和形态学改变。结果通过慢病毒感染MEF的方式获得了小鼠iPSC;小鼠iPSC在非定向分化过程中,生物钟基因Clock、Per2、Rev-erbα表达升高;生物钟基因Clock下调后,小鼠iPSC分化能力下降,多能性基因Sox2、Oct4、Klf4表达升高。结论生物钟基因Clock对小鼠iPSC的非定向分化起到重要作用。
【作者单位】： 复旦大学基础医学院生理与病理生理学系;
【关键词】： 生物钟基因 诱导性多能干细胞 非定向分化 小鼠
【基金】：国家基础科学人才培养基金(J1210041) 国家自然科学基金(81570771)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 昼夜节律是自然界普遍存在的一种生物节律,它使生物体的生理、生化、行为等生命现象表现为近似24 h的节律性[1]。生物钟基因Clock作为第一个被发现和鉴定的生物钟基因,是调节昼夜节律的核心分子,参与维持生物体的多项生命活动[2-3]。近年来研究发现,与分化成熟的体细胞具备生

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