布鲁氏菌Omp19基因真核载体的构建及对细胞免疫的影响
发布时间:2017-06-21 19:15
本文关键词:布鲁氏菌Omp19基因真核载体的构建及对细胞免疫的影响,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的了解羊种布鲁氏菌Omp19基因在真核细胞中的表达和对细胞免疫的影响。方法根据GenBank公布的羊布鲁氏菌16M株外膜蛋白Omp19基因序列设计1对引物,以其全基因组为模板进行扩增,Omp19基因扩增片段连接pMD18-T载体,转染及测序鉴定正确后进行双酶切,构建重组质粒pLEX-MSC-Omp19,转染巨噬细胞RAW264.7中,用Western blot分析Omp19基因在巨噬细胞内的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测转染Omp19基因的细胞干扰素-γ(IFN-γ)和IL-6分泌的影响。结果获得534bp目的基因片段并成功构建Omp19真核表达载体,Omp19基因在巨噬细胞内成功表达,表达蛋白Omp19可显著提高细胞分泌IFN-γ和IL-6水平(P0.01)。结论 Omp19基因表达产物在细胞内具有免疫原性,能提高细胞免疫水平,可作为亚单位疫苗候选基因。
【作者单位】: 铜仁学院护理学院;铜仁学院生物与农林工程学院;石河子大学医学院;铜仁市动物疫病防控中心;石河子大学动物科技学院;
【关键词】: 布鲁氏菌 omp基因 真核载体 细胞免疫
【基金】:国家自然科学基金项目(No.31502067) 杰出青年科技人才培育计划项目(No.2013ZRKXJQ06) 教育厅自然科学基金重点项目(黔教合KY字[2015]411号) 贵州省科技合作计划项目(黔科合LH字[2015]7238号;黔科合LH字[2015]7236号;黔科合LH字[2015]7237号) “野生动植物保护与利用”-省级重点学科项目(黔学位办[2013]18号) 博士科研启动基金项目(No.trxyDH1504)
【分类号】:R378
【正文快照】: ***布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的人兽共患传染病[1-2]。布鲁氏菌为革兰阴性兼性胞内寄生菌,人体感染布鲁氏菌急性期主要表现为恶寒、发热、关节和肌肉痛等,可造成骨关节、神经系统、生殖系统和免疫系统等损害,慢性期主要为骨关节病及包括神经系统在内的多系统多器官损害,患者
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1 杜志强;林涛;王建英;;布鲁氏菌外膜蛋白基因omp19序列克隆与原核表达[J];生物技术;2013年06期
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本文编号:469694
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