PM2.5促进哮喘小鼠模型支气管肺组织新生血管形成
本文关键词：PM2.5促进哮喘小鼠模型支气管肺组织新生血管形成，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：目的:探讨大气PM2.5对哮喘模型小鼠支气管、肺组织新生血管形成的影响及可能的机制。方法:1.大气PM2.5收集:2014年1月-2014年2月期间,收集山西省太原市相对污染区和相对洁净区的PM2.5滤膜。将细颗粒物PM2.5分为上清液(supernatant,Sup)及沉淀物混悬液(precipitant,Pre)。2.雄性BALB/c小鼠随机分成4组:正常对照组(NC组)、哮喘组(Asthma,A组)、哮喘+Sup组(A+Sup组)、哮喘+Pre组(A+Pre组),每组各6只。A组用OVA致敏和激发。A+Sup组,A+Pre组小鼠致敏和激发同A组,每次雾化前鼻腔内滴入25μl细颗粒物的Sup或Pre。3.肺泡灌洗液(BALF)细胞成份检测:细胞形态分类,ELISE法检测BALF中IL-1β、IL-5、IL-13、VEGF浓度。4.经过处理后获得肺组织的切片,观察肺组织HE染色结果和VEGFR表达结果。结果:1.经OVA激发后A组,A+Sup组,A+Pre组小鼠均出现耸毛、烦躁不安、张口呼吸、腹肌抽搐、轻度紫绀、大小便失禁、行动困难、呼吸加快等哮喘发作症状。2.A组、A+Sup组、A+Pre组肺泡灌洗液细胞总数,IL-1β浓度、VEGF浓度,巨噬细胞比例,IL-5浓度,IL-13浓度,淋巴细胞比例均高于NC组,且A+Pre组淋巴细胞和巨噬细胞比例,IL-1β、VEGF浓度高于A组、A+Sup组。相反,A组、A+Sup组肺泡灌洗液嗜酸粒细胞明显高于A+Pre组及NC组。3.肺组织HE染色结果:A组、A+Sup组及A+Pre组均表现为:支气管收缩、支气管纤毛柱状上皮部分脱离、平滑肌层明显增厚、管腔狭窄、肺泡隔增厚及肺泡间质可见大量炎性细胞浸润,血管增生明显,A+Pre组表现更明显。4.使用图像分析仪计算肺组织小血管(血管内径小于50μm)增生数量变化:每高倍视野下NC组为1.5±0.8个,A组4.2±0.4个,A+Sup组7.1±0.7个,A+Pre组8.5±0.6个。5.肺组织免疫荧光染色检测VEGFR2表达结果:VEGFR2在A组、A+Sup组及A+Pre组支气管纤毛上皮、支气管平滑肌层、血管壁均匀强阳性表达,肺组织内小血管分布区域内也可见强阳性表达。A组、A+Sup组及A+Pre组平均荧光强度均高于NC组,且A+Pre组明显高于A组、A+Sup组。结论:PM2.5不同成分对哮喘小鼠模型支气管肺组织炎症有不同影响。PM2.5沉淀物对诱发哮喘新生血管形成、炎症细胞浸润、肺泡灌洗液中炎症介质渗出之间的差异,提示PM2.5诱发哮喘加重存在复杂的机制,除嗜酸细胞参与外,可能与Th1/Th2分化不同有关。
【关键词】：细颗粒物 支气管哮喘 气道重塑 血管新生
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R562.25;R-332
【目录】：
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-9
- 常用缩写词中英文对照表9-10
- 前言10-12
- 1 材料与方法12-15
- 1.1 化学试剂与仪器12
- 1.2 PM2.5 来源12
- 1.3 PM2.5 成分分离12
- 1.4 动物模型12-13
- 1.5 动物处理13
- 1.6 肺组织病理标本制作13
- 1.7 图像分析13-14
- 1.8 统计学方法14-15
- 2 结果15-23
- 2.1 哮喘模型小鼠15
- 2.2 支气管肺泡灌洗液中各个类型细胞计数15-17
- 2.3 支气管肺泡灌洗液细胞因子检测17-19
- 2.4 肺组织HE染色结果19-20
- 2.5 图像分析仪测量20-21
- 2.6 肺组织免疫荧光染色检测21-23
- 3 讨论23-26
- 4 结论26-27
- 参考文献27-29
- 综述29-36
- 参考文献34-36
- 致谢36-38
- 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果38-39
- 个人简历39
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