饥饿诱导的细胞自噬引起UVRAG分子的降解

发布时间：2017-06-28 15:03

  本文关键词：饥饿诱导的细胞自噬引起UVRAG分子的降解，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:观察细胞发生自噬后UVRAG分子水平的改变及其与自噬发生的关系。方法:将p ERFP-LC3真核表达载体的质粒转染RD-A细胞并与次日用不含胎牛血清的eagle’s液代替常规培养基,37℃、5%CO2的条件下饥饿培养6小时,用荧光显微镜观察RFP-LC3聚集情况。将生长到对数生长期的RD-A细胞用不含胎牛血清的eagle’s液代替常规培养基,在37℃、5%CO2条件下分别培养2小时、6小时,用Western Blot检测饥饿诱导细胞内LC3的型别转换及UVRAG分子的水平改变;将生长到对数生长期的RD-A细胞用不含胎牛血清的eagle’s液代替常规培养基,同时应用自噬起始阶段抑制剂3-MA处理细胞,在37℃、5%CO2条件下培养6小时,用Western Blot检测P62和LC3分子的改变及UVRAG分子水平的变化;将生长到对数生长期的RD-A细胞用不含胎牛血清的eagle’s液代替常规培养基,同时应用溶酶体蛋白酶抑制剂E64d和pepstatin A处理细胞,在37℃、5%CO2条件下培养6小时,Western Blot检测P62和LC3分子的改变及UVRAG分子水平的变化。结果:1.饥饿可以诱导或促进RD-A细胞发生自噬;2.RD-A细胞饥饿2小时后,LC3可发生型别转换,自噬已经发生,但UVRAG分子的水平未见改变,饥饿6小时后细胞自噬进一步发展,此时UVRAG分子水平也出现降低;3.用自噬抑制剂3-MA处理饥饿细胞,细胞自噬水平降低,同时UVRAG分子的降解也随之减少;4.用自噬抑制剂E64d和pepstatin A处理饥饿诱导的细胞时,自噬溶酶体对物质的降解作用被抑制,同时UVRAG分子的降解减少。结论:饥饿可以诱导细胞自噬并在形成自噬溶酶体后引起了UVRAG分子的降解。
【关键词】：饥饿 自噬 紫外辐射抗性相关蛋白 自噬抑制剂
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 常用缩写词中英文对照表9-10
• 前言10-15
• 1 材料与方法15-24
• 1.1 实验材料15-17
• 1.2 实验方法17-24
• 2 结果24-30
• 2.1 饥饿对RD-A细胞自噬的影响24-26
• 2.2 饥饿可诱导RD-A细胞发生自噬并降低了自噬分子UVRAG的蛋白水平26-27
• 2.3 3-MA处理细胞后自噬与UVRAG分子水平的变化27-29
• 2.4 E64D和PEPSTATINA处理细胞后自噬与UVRAG分子水平的变化29-30
• 3 讨论30-34
• 4 结论34-35
• 参考文献35-42
• 文献综述42-52
• 参考文献47-52
• 致谢52-54
• 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果54-55
• 个人简历55

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 陈兰芳;肖亮;杨军平;;细胞自噬的分子机制及其功能[J];实验与检验医学;2014年02期

2 张谢;宋毓飞;周华;祁峰;王丹萍;章雅丹;张宏宇;肖健;;bFGF抑制自噬相关蛋白LC3保护大鼠急性脊髓损伤[J];中国药理学通报;2014年11期

3 胡彬;岳青芳;陈烨;卜凡丹;孙春艳;刘新月;;40例MDS患者骨髓单个核细胞内自噬相关基因BECLIN-1表达水平和自噬泡数量检测及其意义[J];中国实验血液学杂志;2015年01期

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本文编号：494240