副溶血弧菌O抗原基因簇中庚糖基转移酶Ⅱ基因缺失株的构建及其功能
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【摘要】:【目的】构建副溶血弧菌庚糖基转移酶Ⅱ基因(waaF)的缺失株,探究waaF基因在副溶血弧菌O抗原合成中的作用。【方法】本研究以副溶血弧菌临床分离株为研究对象,利用甲壳素介导的转化技术构建临床分离株的waaF基因缺失株;分别对野生株、缺失株的生长曲线、菌体形态和血清型进行了测定;利用大肠杆菌S17λpir菌株与副溶血弧菌结合转移的方法,分别构建O3、O5和O10来源的waaF基因的回补株,通过血清型测定,验证同源waaF基因的功能。【结果】成功构建了waaF基因缺失株,基因缺失株生长正常,其生长曲线、菌体形态同野生菌株基本一致,基因缺失株同O抗血清不发生凝集反应,O抗原特性消失。回补实验显示,O3和O5来源waaF基因的回补株能恢复原有O抗原特性,O10来源waaF基因的回补株则不能恢复基因缺失株的O抗原特性。【结论】waaF基因同O抗原的合成相关,是O抗原合成的关键基因,不同O抗原副溶血弧菌中waaF基因功能存在差异。
【作者单位】: 中国水产科学研究院黄海水产研究所;上海海洋大学食品学院;
【关键词】: 副溶血弧菌 O抗原 waaF基因 功能分析
【基金】:国家自然科学基金(31201372)~~
【分类号】:R392
【正文快照】: 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种中在少数几个血清型(O3:K6、O4:K68和O1:KUT等)革兰氏阴性嗜盐菌,属于弧菌属,广泛分布于海中,这几种血清型构成了副溶血弧菌的主要流行洋和河口环境中[1]。人们通常由于食用了生的或群,其中O3:K6型在致病性副溶血弧菌中占80%左者加
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