利用hAPOA1原核蛋白生产兔多克隆抗体

发布时间：2017-07-01 00:00

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【摘要】：将hAPOA1的阅读框连接到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建成正确的pGEX-4T-1-hAPOA1原核表达质粒,然后将其转入宿主菌BL21,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,宿主菌表达出与预期分子量大小相符的55.4ku的融合蛋白;将纯化后的包涵体融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗hAPOA1血清并检测抗体效价。结果表明,经间接酶联免疫吸附测定(ID-ELISA)及蛋白质免疫印迹(WesternBlot)方法证实,获得的融合蛋白免疫新西兰大白兔得到了特异性的多克隆抗体,抗体效价为1∶40000,经济效益可观。
【作者单位】： 江苏丘陵地区镇江农业科学研究所;南京师范大学生命科学学院;
【关键词】： hAPOA 原核表达 新西兰大白兔 融合表达 多克隆抗体
【基金】：江苏省农业科技自主创新资金[编号:CX(16)1326]
【分类号】：R392-33
【正文快照】： 载脂蛋白A1(Apo A1)是apo A族最多的一种组分,apo A1为单一多肽链,由243个氨基酸残基组成,是高密度脂蛋白(HDL)的主要载脂蛋白,不仅是生物试剂的重要原料,也是抗动脉粥样硬化的指标[1]。目前,apo A1的检测多采用免疫比浊法[2],现有的抗载脂蛋白A1抗体的生产采用传统的免疫方式

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本文编号：503861