口腔黏膜微核细胞组分析法初探云南人群基因组健康状况

发布时间：2017-07-03 23:12

  本文关键词：口腔黏膜微核细胞组分析法初探云南人群基因组健康状况

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【摘要】：人类基因组的健康水平即基因组DNA的结构和功能状态对人体健康状况至关重要,基因组损伤是许多发育、退行性疾病和癌症发生的重要原因。人口腔黏膜微核细胞组分析法(Buccal mucosa cytome assay,BMcyt)具有评价细胞增殖、遗传损伤及细胞死亡的功能,比单纯的微核分析更能深入地体现遗传和细胞损伤的机制。该分析体系中具有分裂能力的基底细胞和由胞质分裂受阻形成的双核细胞是细胞增殖的生物标志,正常分化细胞中微核化细胞和具核芽的细胞是遗传损伤的生物标志,分化细胞中核形态为核固缩、染色质凝聚、核破裂、核溶解的细胞是细胞死亡的生物标志。本研究以BMcyt和问卷调查为手段探讨云南人群的基因组健康状况,为此招募了380名健康志愿者,其中男性161例,女性219例,年龄18~66岁,通过分析样本的年龄、性别、体重、身高、烟酒摄入和饮食习惯等信息对口腔黏膜细胞的不同分化与细胞核形态特点的影响,以此评价基因组健康水平及其可能的影响因素,并就BMcyt和问卷建立云南人群基因组健康基础数据库,拟为简化人类基因组损伤分析手段奠定基础。结果显示:(1)受试人群基底细胞频率和双核细胞频率分别是10.31‰±0.65,16.07‰±0.41;具微核、核芽的分化细胞频率分别是5.47‰±0.42,2.01‰±0.14;核形态为核固缩、染色质凝聚、核破裂、核溶解的分化细胞频率分别是8.56‰±0.78、10.0‰±0.42、32.37‰±1.45、22.74‰±1.03。健康人群基底细胞频率与年龄呈显著负相关(r=-0.287,p=0.000),双核细胞频率与年龄亦呈显著负相关(r=-0.167,p=0.001);女性群体的基底细胞频率显著高于男性(p0.01),女性的双核细胞频率略高于男性(p0.05)。提示口腔黏膜细胞的增殖能力随着年龄的增长会相应地减弱,且女性口腔黏膜细胞的增殖能力强于男性。(2)健康人群微核化细胞频率与年龄呈显著正相关(r=0.244,p=0.000),具核芽的细胞频率与年龄无显著相关性(r=-0.057,p=0.266)。正常分化细胞中微核化细胞频率女性要略高于男性(p0.05),具核芽的细胞频率则显著高于男性(p0.01)。提示口腔黏膜细胞的遗传损伤随年龄的增长而升高,且女性的遗传损伤要高于男性。核固缩的细胞频率与年龄呈显著的正相关(r=0.286,p=0.000),男性群体核固缩和核破裂的细胞频率显著高于女性(p0.05),提示口腔黏膜细胞的死亡即细胞损伤随着年龄的增长而升高,且男性的细胞损伤要高于女性.(3)超重群体(BMI"g24)基底细胞频率显著降低(p0.01),核固缩的细胞频率显著增加(p0.01);经常吸烟的人群基底细胞频率和双核细胞频率显著降低(p0.01),核固缩、核破裂、核溶解的细胞频率则显著增加(p0.05);饮酒人群基底细胞频率显著降低(p0.05);经常食用水果的人群其基底细胞频率(p0.05)和双核细胞频率(p0.01)显著增加。研究表明:云南人群女性基因组健康状况要优于男性,基因组健康水平随年龄的增长而降低,不良的生活习惯如吸烟、饮酒会减弱口腔黏膜细胞的增殖能力,加速细胞的死亡,对细胞造成遗传损伤的趋势,对此可通过调整日常的相关饮食习惯来矫正基因组的损伤,以维护整个基因组的稳定性,使其处于相对健康的水平。
【关键词】：口腔黏膜细胞 细胞增殖 遗传损伤 细胞死亡 基因组健康
【学位授予单位】：云南师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R394
【目录】：

• 摘要3-5
• Abstract5-10
• 符号说明10-11
• 第1章 前言11-17
• 1.1 基因组损伤与人类健康概述11-12
• 1.2 口腔黏膜微核细胞组试验12-17
• 1.2.1 BMcyt概述13-14
• 1.2.2 BMcyt评估基因组稳定性14-17
• 第2章 实验材料及方法17-23
• 2.1 研究对象17
• 2.2 主要仪器设备17
• 2.3 实验主要试剂17-18
• 2.4 实验方法18-23
• 2.4.1 口腔黏膜细胞的采集18-19
• 2.4.2 单细胞悬液制备19
• 2.4.3 细胞涂片及染色镜检19
• 2.4.4 BMcyt显微计数19-21
• 2.4.5 数据统计方法21-23
• 第3章 实验结果23-40
• 3.1 口腔黏膜细胞的增殖与性别、年龄的关系23-25
• 3.1.1 本人群各细胞类型的情况描述23
• 3.1.2 基底细胞频率和双核细胞频率与性别、年龄的关系23-25
• 3.2 口腔黏膜细胞的遗传和细胞损伤与性别、年龄的关系25-34
• 3.2.1 正常分化细胞中的微核和核芽频率与性别、年龄的关系25-28
• 3.2.2 核异常分化的细胞中染色质凝聚、核固缩、核破裂和核溶解的细胞频率与性别、年龄的关系28-34
• 3.3 体质指数、生活习性对细胞增殖、遗传损伤和细胞损伤的影响34-40
• 3.3.1 体质指数（BMI）对各生物标志的影响34-35
• 3.3.2 生活习性因子对各生物标志的影响35-40
• 第4章 讨论40-47
• 4.1 健康男女群体在不同年龄段的细胞增殖状况分析40-41
• 4.2 健康男女群体在不同年龄段的遗传损伤和细胞损伤状况分析41-43
• 4.3 体质指数和生活习性对各生物标志的影响分析43-47
• 参考文献47-54
• 附录 文献综述54-65
• 参考文献61-65
• 攻读学位期间完成的学术论文和研究成果65-66
• 致谢66

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本文编号：515534