一株鼠抗人PD-1单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

发布时间：2017-07-16 11:05

  本文关键词：一株鼠抗人PD-1单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

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【摘要】：目的:制备鼠抗人PD-1单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法:以稳定表达人PD-1分子的基因转染细胞株L929/PD-1免疫BALB/c小鼠,采用流式细胞术筛选分泌鼠抗人PD-1单抗的杂交瘤细胞株。用Ig G亚型快速定性试纸法、肿瘤细胞株表面PD-1分子识别谱检测、抗体效价测定、竞争结合抑制实验和蛋白质印迹等方法对所获PD-1单抗的生物学特性进行分析鉴定。结果:获得1株持续稳定分泌PD-1单抗的杂交瘤细胞株,命名为6E1。单抗6E1的重链为Ig G1、轻链为κ。单抗6E1对肿瘤细胞株U937、Thp-1、Jurkat细胞表面PD-1分子的识别谱与商品化PD-1单抗MIH4一致。单抗6E1与商品化抗体MIH4具有相似的识别位点。蛋白质印迹检测结果表明单抗6E1可特异性识别PD-1分子。结论:成功获得了1株鼠抗人PD-1单克隆抗体。
【作者单位】： 苏州大学医学部免疫学系;苏州市立医院北区消化研究中心;
【关键词】： PD- PD-L 单克隆抗体
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31370887,81373149,31200661) 苏州市科技发展计划项目(SYS201363)
【分类号】：R392-33
【正文快照】： 共刺激分子PD-1(CD279)属于B7家族成员。人PD-1基因位于2号染色体,其c DNA全长为2 106个核苷酸,编码相对分子质量为(50~55)×103的Ⅰ型跨膜糖蛋白[1]。PD-1分子诱导性表达于活化的T细胞、B细胞、NK细胞、NKT细胞、单核细胞和树突状细胞[2]。现已发现,PD-1有PD-L1和PD-L2两个配

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本文编号：548335