风疹病毒多表位诊断抗原的制备与评价

发布时间：2017-07-18 14:04

  本文关键词：风疹病毒多表位诊断抗原的制备与评价

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【摘要】：原核表达与层析纯化获取风疹病毒(Rubella Virus,RV)多表位诊断抗原,并初步评价其抗原性。将RV衣壳蛋白C aa 3~29、aa 96~123以及包膜糖蛋白E1aa208~247三个主要免疫显性表位串联,密码子优化后全基因合成;利用基因重组技术将多表位串联片段插入带有GST标签的表达质粒中,在大肠杆菌中进行表达,并利用亲和层析和离子交换层析纯化目的蛋白;利用Western Blot(WB)技术对目的蛋白抗原性进行鉴定,并建立RV-IgM抗体检测ELISA技术,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力。获取高度均质的RV多表位诊断抗原,WB实验表明目的蛋白不但可以被anti-GST单克隆抗体识别,还可以被anti-RV多克隆抗体、RV-IgM阳性血清相应抗体所识别。分别对48份RV急性感染病例的阳性血清、阴性血清和健康人血清进行检测,发现一致性优异。原核表达与层析纯化可以获取抗原性良好的RV多表位诊断抗原,偶联HRP后可以作为检测抗原应用于RV-IgM ELISA血清学检测中。
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所;北京出入境检验检疫技术中心;
【关键词】： 多表位抗原 风疹病毒 原核表达 层析纯化 GST标签
【分类号】：R392;R373.11
【正文快照】： 2.北京出入境检验检疫技术中心,北京100026)风疹病毒(Rubella virus,RV)是风疹的病原体,属于披膜病毒科风疹病毒属,为有包膜正义单链RNA病毒,人是唯一宿主。RV只有一个血清型,但有多个基因型,目前共有12个被认可的基因型(1B,1C,1D,1E,1F,1G,1H,1I,1J,2A,2B,2C)和一个临时基因

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本文编号：558018