基于Caco-2细胞的外源核酸吸收模型的建立及其吸收机制

发布时间：2017-07-20 10:04

  本文关键词：基于Caco-2细胞的外源核酸吸收模型的建立及其吸收机制

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【摘要】：基于人结肠癌细胞系Caco-2细胞建立外源核酸的吸收模型,并在此模型的基础上探究质粒DNA的肠道吸收机制。在Transwell孔膜上培养Caco-2细胞21 d后,通过透射电子显微镜观察细胞形态、监测培养期间跨膜电阻(transepithelial electrical resistance,TEER)值、测定荧光黄透过率评价细胞模型是否成功建成;通过细胞毒性实验探究质粒对细胞生长的影响;将质粒DNA加入细胞模型中进行双向转运实验,探究质粒的肠道吸收规律;在低温和添加特异性抑制剂条件下进行质粒转运实验,进一步推测质粒的肠道吸收机制。结果表明,细胞分化形态良好、TEER值及荧光黄表观透过系数(apparent permeability coefficient,Papp)均符合要求,细胞模型可用于转运实验;质粒对细胞生长无显著抑制作用,可用于转运实验;随着时间的延长,质粒在模型两方向上的转运均呈逐渐饱和趋势,Papp(肠腔侧(apical,AP)→基底侧(basolateral,BL))远大于Papp(BL→AP),提示质粒的转运受到某种载体蛋白的介导,膜介导的跨细胞运输方式可能参与其中;在低温和添加特异性抑制剂条件下,质粒的转运均受到显著抑制,进一步表明该过程是一个跨细胞方式的主动运输过程。
【作者单位】： 中国海洋大学食品科学与工程学院;
【关键词】： Caco-细胞模型 外源核酸 吸收机制 质粒DNA
【基金】：国家自然科学基金青年科学基金项目(31201327;31301420) 国家自然科学基金委员会-山东省人民政府联合资助海洋科学研究中心项目(U1406402) 中国博士后科学基金项目(2015M580609)
【分类号】：R333
【正文快照】： 引文格式:王晓倩,张艳芳,王倩,等.基于Caco-2细胞的外源核酸吸收模型的建立及其吸收机制[J].食品科学,2016,37(23):236-241.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201623039.http://www.spkx.net.cnWANG Xiaoqian,ZHANG Yanfang,WANG Qian,et al.Absorption model and mechanism of exog

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本文编号：567432