稳定表达红色荧光蛋白的人胚胎干细胞系的建立

发布时间：2017-07-31 17:06

  本文关键词：稳定表达红色荧光蛋白的人胚胎干细胞系的建立

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【摘要】：目的 :建立可以稳定表达红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)的人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,h ESCs)系。方法:优化核转染方法后,将RFP表达载体p EF1α-Ds Red-Express2导入h ESCs中。利用碱性磷酸酶染色、RT-PCR、免疫荧光染色和类胚体形等方法,比较核转染前后h ESCs的干细胞特性。结果:核转染后h ESCs的碱性磷酸酶染色结果为阳性。核转染前后h ESCs的Oct4、Sox2、Klf4、Nanog基因的表达未出现明显差异。RFP-h ESCs具有三胚层分化潜能,并且可稳定传30代以上。结论:成功建立稳定表达红色荧光蛋白的h ESCs,干细胞特性不受RFP的影响,可用于后续的实验研究。
【作者单位】： 南京医科大学江苏省异种移植重点实验室;中南大学生殖与干细胞工程研究所;
【关键词】： 人胚胎干细胞 核转染 红色荧光蛋白 类胚体
【基金】：江苏省异种移植重点实验室科研经费(BM2012116)
【分类号】：R329.2
【正文快照】：

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本文编号：600178