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PTEN在骨形态发生蛋白9诱导小鼠胚胎成纤细胞骨向分化中的作用

发布时间:2017-08-03 01:21

  本文关键词:PTEN在骨形态发生蛋白9诱导小鼠胚胎成纤细胞骨向分化中的作用


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【摘要】:目的研究PTEN对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)成骨分化的影响,并分析PTEN调节BMP9功能的可能机制。方法采用定量PCR检测PTEN在间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)中的表达,分析在MEFs中BMP9对PTEN表达的影响。采用组织化学染色法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,PCR检测OPN和OCN的表达水平,茜素红染色检测钙盐沉积,分析PTEN对BMP9诱导MEFs成骨分化的影响;利用荧光素酶报告质粒和蛋白印迹等方法分析PTEN对骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)/Smads信号转导的影响。结果 PTEN在几种常见MSCs中均有表达;BMP9在MEFs中明显抑制PTEN的表达。抑制PTEN能促进BMP9诱导MEFs的ALP活性增加,但过表达PTEN对BMP9诱导MEFs的ALP活性有明显抑制作用。抑制PTEN明显促进BMP9在MEFs细胞中诱导的OCN表达,并增强钙盐沉积。报告质粒分析结果显示,抑制PTEN能明显增强BMPR-Smad报告质粒的转录活性,并增加Smad1/5/8的磷酸化水平。结论下调PTEN表达可能是BMP9诱导MEFs成骨分化重要途径之一,其机制可能与促进BMPs/Smads信号转导有关。
【作者单位】: 重庆医科大学药理学教研室重庆市生物化学与分子药理学重点实验室;
【关键词】骨形态发生蛋白 PTEN 小鼠胚胎成纤维细胞 成骨分化 BMPs/Smads
【基金】:国家自然科学基金面上项目(81372120)~~
【分类号】:R322.71
【正文快照】: 重庆医科大学药理学教研室,重庆市生物化学与分子药理学重点实验室)间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)属于多能干细胞,可被定向诱导分化为脂肪细胞、肌细胞、成骨细胞及软骨细胞等。MSCs被认为是骨组织工程的理想种子细胞之一,在临床治疗骨缺损及骨不连接等疾病中有

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