弓形虫棒状体蛋白ROP38的原核表达与鉴定

发布时间：2017-08-08 04:14

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【摘要】：目的原核表达弓形虫棒状体蛋白ROP38,并对重组蛋白rROP38的反应原性进行鉴定。方法根据已发表的ROP38基因序列设计引物,通过RT-PCR方法扩增弓形虫RH株的ROP38基因。将ROP38部分基因克隆到原核表达载体p ET-28a(+)后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达并优化表达条件,SDS-PAGE分析表达情况,并通过Western blot鉴定其反应原性。结果 SDS-PAGE显示在上清和包涵体均有rROP38表达,分子量约为43k D。Western blot结果显示,rROP38蛋白能被His标签抗体和感染弓形虫的人阳性血清识别,说明ROP38具有良好的反应原性,可以作为潜在的血清学诊断抗原。结论本研究成功获得了具有良好反应原性的弓形虫重组蛋白rROP38。
【作者单位】： 山东省医学科学院 山东省寄生虫病防治研究所;山东省临沂市平邑县畜牧局;山东省临沂市畜牧局;
【关键词】： 弓形虫 棒状体蛋白 原核表达 纳虫空泡
【基金】：国家自然基金青年项目(31502057、81501770)
【分类号】：R382.5
【正文快照】： 刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种重要的人畜共患胞内寄生原虫,能感染哺乳动物、鸟类等所有温血动物[1]。弓形虫病呈世界性分布,全球平均人群感染率为20%~30%,我国人群感染率为5%~20%[2-4]。近年来饲养宠物的增多,使得弓形虫感染率呈逐年上升趋势,但目前仍缺少治疗弓形虫

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