丝素蛋白复合脱钙骨基质修复动物骨缺损模型的试验研究

发布时间：2017-08-24 15:01

  本文关键词：丝素蛋白复合脱钙骨基质修复动物骨缺损模型的试验研究

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【摘要】：目的：在大鼠体内骨缺损模型中,对自制不同比例丝素蛋白复合同种异体脱钙骨基质(demineralized bone matrix, DBM)骨修复情况进行评价分析材料与方法：1.材料制备：①丝素蛋白制备：将家蚕丝脱去丝胶蛋白溶解为溶液冻干；②DBM的制备：将SD大鼠尺桡骨及股骨干的皮质骨经深低温后制成颗粒状；③复合材料的制备：将丝素蛋白与DBM以不同浓度比例共混得到实验材料(DBM含量：0%、10%、20%、40%、80%)。2.实验方法：①分组情况：随机抽取72只8周龄雄性SD大鼠,分别编入不同浓度比例的丝素蛋白与脱钙骨基质复合材料中,A组(不含DBM)、B组(含10%DBM)、C组(含20%DBM)、D组(含40%DBM)、E组(含80%DBM),F组(空白对照),每组12只；②缺损模型制作：在大鼠桡骨中段应用线锯,制作5mm大段骨缺损模型；③材料植入：将各组材料制作成长约5mm宽约1.5mm的长方体植入到大鼠缺损模型中；④检测方法：在手术后二、四、八周,行X线片检测；摄片后,将模型缺损区取出进行大体观察,HE染色、Masson染色、两种免疫组化(Osteocalcin,Collagen I)并进行粘连程度、影像学及免疫组化评分以评估骨缺损愈合情况,利用非参数秩和检验统计方法来分析各组间骨形成的差异性。结果：1.大体观察后应用Hiteheock粘连程度分级评分并做统计分析：在相同时间点各组间粘连评分比较差异无统计学意义(P0.05),不同时间点各组组内比较差异有统计学意义(P0.05)。2.应用Lane-sandhu X线评分并进行统计分析：各时间点D、E组评分较其余组评分高(P0.01),且两组间无明显差异(P0.05)。3.对两种免疫组化(Osteocalci、Collagen I)进行评分并统计分析,经过本实验观察,骨钙素在四周时阳性反应明显,且D、E组阳性颗粒面积与A、B、C、F组有明显差异(P0.01)。经过本实验观察,Ⅰ型胶原在四周及八周阳性反应较明显,D、E组阳性面积较其余组有明显差异,且在四周时,D组优于E组(P0.01),而八周时两者无统计学差异(P0.05)。结论：1.丝素蛋白复合脱钙骨基质修复材料有较好的成骨能力。2.在一定范围内,丝素蛋白复合脱钙骨基质修复材料随脱钙骨基质比例的增加,成骨性能会逐渐增强。3.丝素蛋白与脱钙骨基质比例为6：4(40%DBM)时成骨性能较好,再增加脱钙骨基质的比例并不能提高其成骨性能。
【关键词】：丝素蛋白 脱钙骨基质 骨缺损 复合材料
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R687;R318.08;R-332
【目录】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 中英文缩略词汇对照10-11
• 前言11-12
• 1. 材料与方法12-14
• 1.1 主要仪器12
• 1.2 主要试剂12-13
• 1.3 实验动物13
• 1.4 材料制备13-14
• 1.4.1 丝素蛋白制备13
• 1.4.2 DBM制备13-14
• 1.4.3 丝素蛋白复合DBM骨修复材料的制备14
• 2 骨缺损模型的建立与分组14-15
• 2.1 实验分组14-15
• 2.2 手术操作15
• 3. 检测指标15-20
• 3.1 大体观察15-16
• 3.2 X线检测16
• 3.3 组织学检测16-19
• 3.3.1 HE检测17
• 3.3.2 改良Masson三色染色17-18
• 3.3.3 免疫组化检测(免疫酶细胞技术)18-19
• 3.4 统计学分析19-20
• 4 结果20-32
• 4.1 大体观察结果及分析20-21
• 4.2 X线观察结果与分析21-23
• 4.3 组织学观察23-32
• 4.3.1 HE染色结果观察23-25
• 4.3.2 Masson染色结果观察25-27
• 4.3.3 Osteocalci免疫组化结果观察及统计分析27-29
• 4.3.4 Collagen Ⅰ免疫组化结果观察29-32
• 5. 讨论32-35
• 5.1 临界缺损模型的建立33
• 5.2 丝素蛋白复合脱钙骨基质骨修复材料33-34
• 5.3 实验结果的分析34-35
• 6. 结论35-36
• 参考文献36-41
• 文献综述41-49
• 参考文献44-49
• 攻读学位期间发表文章情况49-50
• 致谢50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 鞠刚;徐卫袁;张亚;张兴祥;严飞;沙卫平;;多孔丝素蛋白/羟基磷灰石复合脂肪间充质干细胞修复兔关节软骨及软骨下骨缺损[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年29期

2 汤译博;赵亮;苏佳灿;;骨折动物模型的研究进展[J];中国骨伤;2011年01期

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本文编号：731931