抗PSMA膜外域单克隆抗体的制备及初步应用

发布时间：2017-08-26 05:28

  本文关键词：抗PSMA膜外域单克隆抗体的制备及初步应用

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【摘要】：目的:制备抗PSMA膜外域单克隆抗体。方法:应用生物信息技术预测PSMA膜外域多肽抗原片段,原核表达,免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗PSMA膜外域单克隆抗体,亲和层析纯化和Western blot及ELISA鉴定,并用于前列腺癌动物模型放射免疫显像。结果:经软件分析,获得含310aa序列特异性强的膜外域抗原片段,免疫、融合后,经过ELISA筛选获得到3株阳性杂交瘤细胞株(5E6、4A5和4D7),亚型鉴定结果为5E6、4A5为Ig G2a,4D7为Ig G1,腹水型抗体效价均在1∶256 000以上;Western blot结果表明,所制备的单克隆抗体均可与PSMA膜外域抗原特异性结合,竞争抑制ELISA试验显示制备的单抗与重组抗原及标准抗原PSMA能竞争结合。动物模型放射免疫显像结果进一步证实,制备的单克隆抗体在动物体内能与PSMA膜外域抗原特异性结合,并使肿瘤显像。结论:制备的抗PSMA膜外域单克隆抗体能特异性识别PSMA抗原,为前列腺癌的免疫诊断及免疫治疗奠定了基础。
【作者单位】： 上海市中医药大学附属普陀医院;
【关键词】： 前列腺特异性膜抗原(PSMA) 单克隆抗体 前列腺癌
【基金】：上海中医药大学附属普陀医院院级课题(No.2013GQ014Ⅱ)
【分类号】：R392
【正文快照】： 1本文为上海中医药大学附属普陀医院院级课题(No.2013GQ014Ⅱ)。前列腺特异性膜抗原(Prostate specific membrane antigen,PSMA)是前列腺上皮细胞膜的一种Ⅱ型跨膜糖蛋白,共750个氨基酸残基,由三个结构域组成,分别是含19个氨基酸的胞内域,含24个氨基酸的跨膜域和含707个氨基酸

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