人脐带间充质干细胞分离培养及鉴定的相关研究

发布时间：2017-09-07 00:30

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【摘要】：目的:原代培养并鉴定人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs),对h UCMSCs的生物学性状、表面抗原、多向分化潜能等进行研究,并初步检测其内源性Hedgehog(Hh)信号通路主要因子的RNA水平。方法:取足月健康剖宫产胎儿脐带,提取h UCMSCs,贴壁培养。绘制生长曲线,检测细胞周期。进行体外成骨、成脂及成软骨诱导。流式细胞仪检测细胞表面标志物。Real-time PCR检测原代细胞内源性Hh信号通路主要因子的m RNA水平。结果:脐带剪碎经胶原酶消化后24 h细胞即可贴壁,7 d可生长达培养皿底面积85%融合。P_3代h UCMSCs的生长曲线呈上升趋势,传代后第3 d进入倍数生长期。并具有成骨分化、成脂分化及成软骨分化的能力。流式细胞仪检测99.04%的细胞高表达整合素分子CD29,98.80%的细胞高表达粘附分子CD44,85.09%的细胞高表达内皮糖蛋白分子CD105,只有0.19%的细胞表达造血干细胞标记物CD45,0.58%的细胞表达血管内皮分子CD34。脐带来源的间充质干细胞内能检测到Hh信号通路中主要因子的内源性表达,其中Shh水平相对较高。结论:原代培养的h UCMSCs为进一步探索Hh信号通路在颅颌骨缺损修复中的作用机制提供可靠的细胞来源。
【作者单位】： 华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心;
【关键词】： 人脐带间充质干细胞 生物学性状 Hh信号通路
【基金】：国家自然科学基金(81400490) 湖北省自然科学基金(2014CFB388)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 颌骨及牙槽骨缺损修复时新骨形成的质量、速度和长期稳定性直接关系到口腔修复体的设计及预后[1]。在颅颌面骨缺损再生的临床及基础研究中,具有多向分化潜能的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)能分化为成骨细胞及破骨细胞,成为骨再生研究的主要种子细胞[2-6]。迄今

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